青稞散黑穗病拮抗菌LN-176的分離鑒定、發(fā)酵條件及發(fā)酵產(chǎn)物的初步研究.pdf

1、從西藏佩古錯湖湖邊的土壤中分離得到一株對青稞散黑穗病原菌具有較強抑制作用的細菌，根據(jù)菌株的形態(tài)學特征和生理生化試驗，初步鑒定為多粘芽孢桿菌(Bacillus polymyxa)，命名為LN-176。菌體呈細桿狀，革蘭氏染色陽性，染色均勻，具運動性，可形成內(nèi)生孢子，芽孢囊膨大，芽孢橢圓形，中生到次端生。該菌株在LB培養(yǎng)基上呈白色圓形不透明菌落，直徑約1～2mm，菌落邊緣不規(guī)則，表面干燥。能發(fā)酵葡萄糖、木糖、甘露醇產(chǎn)酸并產(chǎn)氣，不能發(fā)酵阿拉伯

2、糖。能還原硝酸鹽，形成二羥基丙酮，但不能利用檸檬酸鹽和丙酸鹽，對NaCl的耐受量低于5％。根據(jù)以上特征，查閱《伯杰細菌鑒定手冊》(第九版)可初步將其鑒定為芽孢桿菌屬的多粘芽孢桿菌(B.polymyxa)，命名為B.polymyxa LN-176。 進一步通過PCR擴增克隆得到LN-176的16S rDNA并測序。將該序列在GenBank中進行同源性比對，所獲得的同源序列均為芽孢桿菌屬和類芽孢桿菌屬的16S rDNA序列，

3、其同源性都在90％以上。與該序列同源性最高的是芽孢桿菌屬B.polymyxa，其同源性達100％，與類芽孢桿菌屬R.kribbensis、P.azotofixans、P．burgondia、P．peoriae的同源性均為99％。在此基礎上將BLAST得到的16S rDNA序列用DNAman軟件構建系統(tǒng)發(fā)育樹。分子鑒定的結(jié)果進一步表明LN-176菌株為芽孢桿菌屬的多粘芽孢桿菌。 該菌株對多種植物病原菌、部分革蘭氏陽性菌及革蘭氏陰性