竹黃分離菌液態(tài)發(fā)酵有色產(chǎn)物的分離純化及功能研究.pdf

1、竹黃是一種珍貴的中藥材，其子座中含有多種活性成分，如竹紅菌素、竹黃多糖等，具有通經(jīng)散瘀、消痰止咳、強(qiáng)身健體和鎮(zhèn)靜等作用。隨著對(duì)竹黃研究的不斷地深入，其藥用價(jià)值越來越突出，但由于天然竹黃資源有限，無法滿足人們對(duì)其利用的需求，為此人們開始研究竹黃的分離菌株，對(duì)其進(jìn)行人工培養(yǎng)，期待能夠得到竹黃的活性成分。本論文以竹黃分離菌葦狀節(jié)孢霉（Arthriniumarundinis）為試驗(yàn)菌株，研究其在培養(yǎng)過程中的生長(zhǎng)規(guī)律、有色產(chǎn)物的分離鑒定及其穩(wěn)定性

2、和基本功能，結(jié)果如下:
　　1、竹黃分離菌培養(yǎng)生長(zhǎng)規(guī)律:在固體培養(yǎng)基中，初期菌絲體為白色，呈輻射狀向周圍生長(zhǎng)，培養(yǎng)4d后開始產(chǎn)生少量紅色物質(zhì)，該產(chǎn)物釋放在菌絲體外，存在于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)到后期菌絲體顏色變暗，生長(zhǎng)緩慢;在液體培養(yǎng)基中，菌絲體為白色，黏滑，散生，培養(yǎng)3d后開始有少量紅色物質(zhì)產(chǎn)生，該產(chǎn)物釋放在菌絲體外，存在于培養(yǎng)基中，后期生長(zhǎng)緩慢。
　　2、有色發(fā)酵產(chǎn)物的分離鑒定:運(yùn)用大孔吸附樹脂對(duì)竹黃分離菌發(fā)酵液中紅色產(chǎn)物進(jìn)行吸

3、附分離，選擇HPD300作為吸附樹脂，50％的乙醇為洗脫液，獲得有色發(fā)酵產(chǎn)物的富集物。通過薄層層析、高效液相色譜分離發(fā)現(xiàn)該有色發(fā)酵產(chǎn)物的極性很強(qiáng)，常規(guī)方法難以實(shí)現(xiàn)該產(chǎn)物的的有效分離。利用發(fā)酵液酸水解、有機(jī)溶劑萃取、兩次硅膠柱層析得到了兩種純度較高的物質(zhì)，通過質(zhì)譜檢測(cè)，兩種物質(zhì)的分子量分別為191和338。利用無色亞甲基藍(lán)顯色反應(yīng)對(duì)發(fā)酵液的正丁醇萃取物進(jìn)行定性鑒定，該產(chǎn)物很有可能為苯醌或萘醌類物質(zhì)，排除其為蒽醌類色素的可能性。
　　

4、3、有色發(fā)酵產(chǎn)物的穩(wěn)定性:對(duì)竹黃分離菌有色發(fā)酵產(chǎn)物的穩(wěn)定性進(jìn)行研究后發(fā)現(xiàn)，溫度、光照對(duì)其穩(wěn)定性影響不是很大，該有色產(chǎn)物的穩(wěn)定性受pH和金屬離子的影響較明顯，在酸性環(huán)境中比堿性環(huán)境中要穩(wěn)定，不同的金屬離子對(duì)有色發(fā)酵產(chǎn)物的穩(wěn)定性影響也不同，在一定的濃度范圍內(nèi)，Mg2+、Ca2+、Zn2+、Al3+、Cr3+、Cu2+、Na+對(duì)有色發(fā)酵產(chǎn)物的穩(wěn)定性影響較小，F(xiàn)e3+對(duì)有色發(fā)酵產(chǎn)物具有減色作用。
　　4、有色發(fā)酵產(chǎn)物粗品的功能:對(duì)竹黃分離