肽修飾的甲氨蝶呤急性毒性及體內(nèi)釋放研究.pdf

1、目的：本研究對受體結(jié)合肽修飾的甲氨蝶呤(LHRH-MTX)與甲氨蝶呤(MTX)進(jìn)行對比,比較其急性毒性的變化,并初步評估LHRH-MTX在模型動物體內(nèi)釋放甲氨蝶呤的情況。
　　 方法：采用尾靜脈注射給藥,觀察肽修飾的甲氨蝶呤對KM小鼠的急性毒性;將乳腺癌MCF-7細(xì)胞(1×107/ml,0.2ml)皮下接種于BALB/cA裸鼠,通過病理學(xué)和免疫學(xué)方法檢測建立荷瘤裸鼠腫瘤部位LHRH受體的表達(dá);通過靜脈注射給藥,用高效液相色譜法分

2、析LHRH-MTX在荷瘤裸鼠血液、各器官以及腫瘤組織釋放甲氨蝶呤的情況,并于MTX制劑比較,以初步評價LHRH-MTX的靶向遞送藥物的能力。
　　 結(jié)果：通過給KM小鼠靜脈注射LHRH-MTX,測得其小鼠靜脈給藥LD50值為278.4mg/kg,其95％的可信限為232.2-333.8mg/kg。皮下接種后30天可得直徑1.5cm瘤體,腫瘤部位LHRH受體陽性表達(dá)的荷瘤裸鼠模型,接種成功率高達(dá)97.5%。建立了MTX在荷瘤裸鼠體

3、內(nèi)的HPLC分析方法,該方法的回收率高于85%,日問和日內(nèi)RSD均小于10%,符合生物樣品分析要求。檢測靜脈注射LHRH-MTX和普通MTX制劑后1h、2h、4h、12h、24h各時間點在荷瘤小鼠血液、心臟、肝臟、脾臟、腎臟、腫瘤部位MTX的濃度,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,LHRH-MTX組與MTX制劑組有明顯差異,LHRH-MTX組的MTX濃度在血液、肝臟、腎臟的濃度有明顯下降(P＜0.05),而在腫瘤組織有明顯提高(P＜0.05)。