蛋白質(zhì)磷酸酶1（PP-1）對(duì)轉(zhuǎn)錄因子Pax-6的功能修飾.pdf

1、Pax-6是進(jìn)化上一個(gè)保守而重要的轉(zhuǎn)錄因子，它在眼睛與大腦發(fā)育中起著主導(dǎo)基因的作用，決定著人類(lèi)，小鼠，斑馬魚(yú)和果蠅的晶體細(xì)胞分化。 到目前為止，不同形式的Pax-6已被發(fā)現(xiàn)，它們有著不同的分子量。但這并不意味著它們中的全部都已經(jīng)被仔細(xì)的研究過(guò)，也并不意味著它們的蛋白質(zhì)翻譯后修飾作用被完整的詮釋。前人的研究已經(jīng)表明Pax-6是一個(gè)磷酸化蛋白，它受ERK，p38和HIPK2這三種激酶作用而發(fā)生磷酸化，并且它在磷酸化以后能大大的激活

2、其轉(zhuǎn)錄的活性。然而，其去磷酸化修飾作用卻不為人所知。 為了了解Pax-6的脫磷酸化修飾作用，作者首先研究了蛋白質(zhì)絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶使Pax-6脫磷酸化的可能性。研究結(jié)果表明，PP-1和PP-2A這兩種蛋白質(zhì)磷酸酶均能在體外使Pax-6脫磷酸化。第二，作者檢測(cè)了是否PP-1與PP-2A這兩種蛋白質(zhì)磷酸酶能特異地在體內(nèi)使Pax-6脫去磷酸基團(tuán)。結(jié)果表明，只有PP-1能與Pax-6在體內(nèi)發(fā)生反應(yīng)，使其脫磷酸化。第三，通過(guò)免疫共沉降

3、的辦法，作者發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)的大部分Pax-6與PP-1的α催化亞基，或者β催化亞基結(jié)合在一塊；然而只有少量的α催化亞基或者β催化亞基與Pax-6結(jié)合；PP-2A的A，B，C三種亞基與Pax-6沒(méi)有相互作用。第四，隨著Calyculin A這種PP-1抑制劑處理濃度的提高，與Pax-6結(jié)合的PP-1α催化亞基或者β催化亞基依次減少。當(dāng)在人類(lèi)晶體上皮細(xì)胞(HLE)中高表達(dá)PP-1α?xí)r，Pax-6的脫磷酸化增強(qiáng)；而此時(shí)用Calyculin A處理