水稻類鈣調(diào)磷酸酶亞基B蛋白質(zhì)在逆境脅迫下的表達(dá)研究.pdf

1、背景:鈣信號(hào)鈣離子被認(rèn)為是具有廣譜作用的第二信使，在植物中，胞內(nèi)鈣離子的水平受各種因素的影響，如非生物脅迫、病原物及激素等。逆境是指顯著偏離植物最適生活條件的環(huán)境。逆境的影響廣泛涉及各種植物生理和生化過(guò)程，嚴(yán)重時(shí)影響植物的正常生長(zhǎng)甚至導(dǎo)致死亡。水稻作為世界上最重要的糧食作物之一，同時(shí)也是基礎(chǔ)研究的模式植物，比較容易受各種逆境的影響從而造成減產(chǎn)甚至絕收，因此了解水稻感知和抵抗環(huán)境脅迫的機(jī)理就顯得尤為重要。類鈣調(diào)磷酸酶亞基B蛋白質(zhì)(Calc

2、ineurinB-like protein，CBL)只存在于植物中，其與CIPK(CBL-interacting protein kinase，CIPK)形成鈣信號(hào)傳遞的通路之一。已有研究表明，水稻CBL家族成員在調(diào)控植物對(duì)逆境脅迫的反應(yīng)中發(fā)揮作用。
　　 研究目的:針對(duì)水稻CBL基因家族編碼蛋白質(zhì)制備對(duì)應(yīng)的抗體，探究CBL家族蛋白質(zhì)在水稻9311的不同逆境脅迫過(guò)程中的表達(dá)模式，為下一步進(jìn)行蛋白質(zhì)功能的研究奠定基礎(chǔ)。
　　

3、 材料與方法:水稻種子在37℃浸種48 h，萌發(fā)的水稻幼苗在光照培養(yǎng)箱中生長(zhǎng)，培養(yǎng)條件為溫度28℃，光照/黑暗周期為14/10 h，培養(yǎng)液為1/2 Hogland。以培養(yǎng)14d的材料進(jìn)行各種脅迫處理，以未經(jīng)脅迫正常生長(zhǎng)的水稻為對(duì)照。對(duì)候選基因編碼的蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原決定簇預(yù)測(cè)，合成多肽后免疫兔子制備多克隆抗體。用Western Blotting檢測(cè)CBL基因編碼蛋白質(zhì)在水稻品種9311苗期的不同脅迫條件下的表達(dá)及差異。
　　 結(jié)果

4、:利用Western Blotting檢測(cè)了6個(gè)CBL基因編碼蛋白質(zhì)在水稻葉片不同脅迫處理的表達(dá)，揭示了其表達(dá)模式。發(fā)現(xiàn)了CBL1、CBL2、CBL5、CBL6、CBL8和CBL10這6個(gè)蛋白質(zhì)的表達(dá)發(fā)生變化在不同品種的不同脅迫的不同時(shí)期，其余蛋白質(zhì)用抗體檢測(cè)未發(fā)現(xiàn)變化。
　　 結(jié)論:通過(guò)對(duì)CBL在葉片脅迫過(guò)程中的表達(dá)分析，鑒定到在非生物逆境脅迫下表達(dá)發(fā)生變化的6個(gè)水稻CBL蛋白質(zhì)，其中，OsCBL1、OsCBL5和OsCBL6