聚卟啉鐵整體柱的制備及其色譜性能研究.pdf

1、作為細(xì)胞中的活性大分子，蛋白質(zhì)是與疾病相關(guān)的主要分子，蛋白表達(dá)水平的改變與疾病直接相關(guān)。因此研究如何對蛋白質(zhì)進(jìn)行分離、鑒定，是一項(xiàng)具有重要意義的工作。 整體柱具有制備方法簡單、通透性好等特點(diǎn)，已被較廣泛的用作高效液相色譜固定相，用于蛋白質(zhì)的分離、分析中。通過兩種聚合方式制備了兩種聚卟啉鐵整體柱，并分別以其為固定相，通過高效液相色譜法對幾種標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)和幾種實(shí)際生物樣品進(jìn)行了成功分離。
　　本文首先通過原位自由基聚合方式，以卟啉鐵（H

2、emin）、甲基丙烯酸縮水甘油酯（GMA）作為二元單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯（EDMA）作為交聯(lián)劑，1,4-丁二醇、丙醇、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）為致孔劑，偶氮二異丁腈（AIBN）為引發(fā)劑，制備得到聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整體柱。通過掃描電鏡、紅外光譜法、氮吸附-脫附法和壓汞法等方法對得到的整體柱進(jìn)行了表征。將該整體柱用作高效液相色譜的固定相，在8分鐘內(nèi)對三種標(biāo)準(zhǔn)蛋白進(jìn)行了成功分離；此外，還分離了雞卵清以及細(xì)

3、胞色素C的酶解液，結(jié)果表明卟啉鐵的加入增強(qiáng)了該整體柱對蛋白質(zhì)的選擇性，對實(shí)際蛋白質(zhì)樣品具有一定的分離能力。其次，為了改善整體柱孔結(jié)構(gòu)的均勻性并提升其對蛋白質(zhì)的選擇性，采用活性-可控的原子轉(zhuǎn)移自由基聚合法（atom transfer radical polymerization, ATRP）制備了聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整體柱。利用該整體柱對幾種標(biāo)準(zhǔn)蛋白進(jìn)行了成功分離。此外，還分別對人血漿及蝸牛酶進(jìn)行了分離。結(jié)果表明