基質(zhì)金屬蛋白酶-2--9參與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜血管翳形成的初步研究.pdf

1、研究背景及目的：
　　類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以侵襲性關(guān)節(jié)炎為主要表現(xiàn)的慢性全身性自身免疫性疾病?；ぱ荇栊纬墒荝A病變過(guò)程中一個(gè)特征性的病理改變，主要由增生的滑膜細(xì)胞、新生血管、包繞在新生小血管周圍的炎癥細(xì)胞及纖維組織構(gòu)成，以“類腫瘤樣”的方式向關(guān)節(jié)軟骨內(nèi)侵襲性生長(zhǎng)，是導(dǎo)致關(guān)節(jié)的骨和軟骨的破壞的主要原因，推動(dòng)著 RA疾病的發(fā)生發(fā)展?；|(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloprot

2、einases，MMPs）作為降解細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matric，ECM）最重要的蛋白酶，參與胚胎正常發(fā)育及組織重塑，也在炎癥反應(yīng)、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、惡性腫瘤浸潤(rùn)、動(dòng)脈粥樣硬化、腦血管病等多種病理過(guò)程中發(fā)揮作用。
　　MMPs的表達(dá)異?？纱龠M(jìn)RA疾病的發(fā)生發(fā)展，其中明膠酶MMP-2、MMP-9發(fā)揮著重要作用，它們?cè)赗A關(guān)節(jié)滑液中含量明顯增高，在滑膜組織上也表達(dá)過(guò)量，一方面通過(guò)降解明膠、多種膠原、彈性蛋白、纖維連接

3、蛋白等等關(guān)節(jié)軟骨成分直接參與RA關(guān)節(jié)軟骨的破壞，一方面發(fā)揮化學(xué)趨化作用，參與介導(dǎo)多種炎性介質(zhì)釋放，在吸引炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)及加強(qiáng)滑膜炎癥反應(yīng)發(fā)揮重要作用。近來(lái)，MMP-2及MMP-9在新生血管生成中的作用也逐漸受到人們重視，其在腫瘤瘤內(nèi)血管新生、侵襲及轉(zhuǎn)移中的重要地位已通過(guò)體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，在RA關(guān)節(jié)滑液中也發(fā)現(xiàn)其過(guò)量表達(dá)與滑膜血管新生密切相關(guān)，由此可以推測(cè)這兩種明膠酶在RA滑膜血管翳“類腫瘤樣”生長(zhǎng)形成過(guò)程中也發(fā)揮作用，推進(jìn)疾病病程發(fā)展。目

4、前，已有文獻(xiàn)報(bào)道在RA外周血、關(guān)節(jié)滑液以及滑膜組織中檢測(cè)到 MMP-2，9表達(dá)明顯增高，并且表達(dá)水平高于骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）患者及正常人群，但在RA滑膜血管翳中兩者的具體的免疫定位尚未十分明確。
　　本研究旨在通過(guò)觀察活動(dòng)期RA滑膜血管翳結(jié)構(gòu)特點(diǎn)以及MMP-2、MMP-9在血管翳中的免疫定位，初步研究MMP-2、MMP-9在RA滑膜血管翳形成中發(fā)揮的作用，為RA的治療提供新的靶點(diǎn)及新的思路。
　　材

5、料與方法：
　?、俦狙芯渴占颂K大附三院經(jīng)關(guān)節(jié)鏡下手術(shù)切除的RA患者膝關(guān)節(jié)滑膜組織3例作為研究對(duì)象；②所有標(biāo)本均經(jīng)10％福爾馬林固定、脫水、石蠟包埋、以3pm連續(xù)切片等程序制片，H&E染色RA滑膜組織，并選用兔抗人MMP-2、MMP-9單克隆抗體進(jìn)行免疫組織化學(xué)及熒光染色；③運(yùn)用激光共聚焦成像觀察MMP-2、MMP-9在RA滑膜血管翳中的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　我們?cè)诠忡R下觀察到RA滑膜血管翳的存在，其中包含大量新

6、生血管、滑膜細(xì)胞及免疫細(xì)胞，并且MMP-2及MMP-9在RA滑膜組織上高表達(dá)；雙重免疫熒光染色標(biāo)記及激光共聚焦檢測(cè)顯示在RA滑膜組織中的滑膜細(xì)胞及CD34+血管內(nèi)皮細(xì)胞上均觀察到MMP-2、MMP-9的陽(yáng)性表達(dá)，此外，MMP-2還可以表達(dá)在浸潤(rùn)的CD14+單核細(xì)胞及CD68+巨噬細(xì)胞上，MMP-9則可表達(dá)CD68+巨噬細(xì)胞，在CD14+單核細(xì)胞上呈陰性表達(dá)；而在CD3+T細(xì)胞、CD20+B細(xì)胞上均未觀察到MMP-2及MMP-9的表達(dá)。<