量子點(diǎn)(CdSe)標(biāo)記糖類分子的研究.pdf

1、量子點(diǎn)由于其優(yōu)良的熒光性能，目前已廣泛應(yīng)用于生物工程領(lǐng)域。CdSe量子點(diǎn)表面經(jīng)過修飾后，表面帶有活性功能基團(tuán)，通過分子偶聯(lián)作用，可以連接DNA，蛋白質(zhì)等。目前在量子點(diǎn)的制備方法中，有機(jī)合成法是較成熟的，這種方法可以獲得熒光效率高，顆粒均一的量子點(diǎn)。但是有機(jī)合成法中存在嚴(yán)重的問題，比如三辛基氧膦（TOPO）等具有較強(qiáng)的毒性，而且操作繁瑣，制得的QDs表面有一層TOPO，TOPO不僅具有毒性，而且是疏水性物質(zhì)，這樣使得所制得的量子點(diǎn)不具有水

2、溶性，對(duì)于QDs應(yīng)用于生物學(xué)領(lǐng)域是不利的。
　　 本實(shí)驗(yàn)中建立了量子點(diǎn)的水相合成法，并且通過糖類分子修飾量子點(diǎn)從而使得量子點(diǎn)可以通過細(xì)胞表面凝集素的作用而進(jìn)入HepG2細(xì)胞中，討論了在細(xì)胞毒性方面，量子點(diǎn)糖基化修飾的優(yōu)勢(shì)。
　　 （1）水相合成量子點(diǎn)條件：400mgSe和400mgNaBH4在1ml水溶液中反應(yīng)2h后，取0.25ml加入到90ml含有25mg的CdCl2·2.5H2O和0.025ml巰基乙酸的水溶液中，9

3、6℃回流2h制得量子點(diǎn)，將制得的量子點(diǎn)通過紅外，紫外，電鏡以及熒光等方面進(jìn)行表征，結(jié)果證明獲得了大小均一，顆粒分散的量子點(diǎn)，并且使用殼聚糖來包裹量子點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)了量子點(diǎn)對(duì)納米載藥分子的標(biāo)記。
　　 （2）將量子點(diǎn)與9種糖類分子分別進(jìn)入連接，并且將連接后的產(chǎn)物加到HepG2細(xì)胞培養(yǎng)液中，進(jìn)行篩選，最終發(fā)現(xiàn)甘露糖修飾的量子點(diǎn)可以進(jìn)入HepG2細(xì)胞中，這和文獻(xiàn)報(bào)道的HepG2細(xì)胞表面甘露糖凝集素大量表達(dá)相一致，這一結(jié)果對(duì)于研究癌細(xì)胞表面凝

4、集素，以及通過糖類分子來標(biāo)記癌細(xì)胞提供有一定的依據(jù)。此外，甘露糖修飾的量子點(diǎn)對(duì)HepG2細(xì)胞沒有表現(xiàn)出細(xì)胞毒性，而且仍可長(zhǎng)時(shí)間的保持熒光特性。通過小鼠的荷瘤模型也發(fā)現(xiàn)，在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，甘露糖修飾的量子點(diǎn)也可以標(biāo)記HepG2細(xì)胞。
　　 （3）通過量子點(diǎn)以及甘露糖修飾的量子點(diǎn)分別同牛血清白蛋白作用，牛血清白蛋白通常被用做研究藥物分子在體內(nèi)的藥物藥理等研究，發(fā)現(xiàn)量子點(diǎn)被甘露糖修飾后，與BSA的結(jié)合明顯降低，這對(duì)于量子點(diǎn)在體內(nèi)毒性研究是

5、有利的，在量子點(diǎn)表面降低毒性的修飾是一個(gè)補(bǔ)充。另外研究了量子點(diǎn)與牛血清白蛋白的作用，發(fā)現(xiàn)量子點(diǎn)可以引起B(yǎng)SA的猝滅，這個(gè)猝滅的過程是一個(gè)靜態(tài)的猝滅過程，它們之間以摩爾比1：1結(jié)合，根據(jù)同步熒光光譜，可以得出，量子點(diǎn)主要與BSA的酪氨酸連接，而不與絲氨酸相作用。根據(jù)F?ste偶極能量轉(zhuǎn)移理論，可以計(jì)算出量子點(diǎn)與BSA的作用距離6.56nm，小于8nm，說明量子點(diǎn)與BSA的結(jié)合是個(gè)有效結(jié)合。這些對(duì)于研究量子點(diǎn)的體內(nèi)毒性及量子點(diǎn)體內(nèi)藥理等，提