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文檔簡介
1、經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)端粒酶hTERT mRNA是端粒酶中只在惡性腫瘤細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的成分。因此本研究提出采用CdSe納米量子點(diǎn)作為熒光材料,開發(fā)一種以hTERT mRNA為靶標(biāo)的量子點(diǎn)分子信標(biāo)。擬開發(fā)一種能夠快速檢測的方法來確定細(xì)胞是否癌變。研究的主要內(nèi)容包括:
一、CdSe量子點(diǎn)的制備及其光學(xué)性質(zhì)的研究
通過一鍋法制備了水溶性極好的CdSe量子點(diǎn)。經(jīng)過紫外光譜檢測,該CdSe量子點(diǎn)在380nm處有最大吸收,并且吸收峰單一;經(jīng)熒光
2、光譜分析顯示,該CdSe量子點(diǎn)在550nm處有最大發(fā)射波,其熒光強(qiáng)度高達(dá)6500,斯托克位移長達(dá)170nm。隨著pH的升高(由6.3至8),熒光強(qiáng)度逐漸加強(qiáng);隨溫度的升高,熒光強(qiáng)度則不斷減弱。實(shí)驗(yàn)證明巰基乙酸濃度和陳化溫度的提高會直接影響量子點(diǎn)的尺寸效應(yīng),產(chǎn)生不同于體材結(jié)構(gòu)的缺陷發(fā)射。不同濃度TGA對CdSe量子點(diǎn)的紫外吸收影響不明顯,而隨著TGA濃度的增加,CdSe量子點(diǎn)的熒光發(fā)射峰從570nm出現(xiàn)藍(lán)移,并最終穩(wěn)定在550nm處;Cd
3、Se量子點(diǎn)的紫外吸收峰和熒光發(fā)射峰均隨陳化溫度的升高而藍(lán)移。
二、Cd體材量子點(diǎn)對KM小鼠的急性毒性研究
通過對CdSe量子點(diǎn)的制備,選取兩種Cd體材的量子點(diǎn),CdSe量子點(diǎn)和CdSe-ZnS量子點(diǎn)。用其喂養(yǎng)小白鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,三組小鼠在實(shí)驗(yàn)前前生長狀況良好。A組用去離子水喂養(yǎng)數(shù)天后天后,小鼠狀態(tài)無異常。B組用CdSe量子點(diǎn)溶液喂養(yǎng)后,小鼠有點(diǎn)萎靡,毛發(fā)微微豎立,呼吸較為均勻,排便正常,進(jìn)食正常。C組用CdSe-Zn
4、S量子點(diǎn)溶液喂養(yǎng)后,狀況與B組相似,較B組稍好。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明CdSe量子點(diǎn)和CdSe-ZnS量子點(diǎn)對小鼠產(chǎn)生輕微影響,但毒性不大。對小鼠血液的熒光切片顯示CdSe量子點(diǎn)能夠進(jìn)入小鼠血細(xì)胞。其白光切片顯示小鼠的血細(xì)胞圓潤飽滿,情況良好,分布略微不均勻,但不影響總體觀察。對小鼠的紅細(xì)胞數(shù)量和白細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示,由CdSe量子點(diǎn)溶液喂養(yǎng)小老鼠的紅細(xì)胞和白細(xì)胞數(shù)量均低于正常范圍;用CdSe-ZnS量子點(diǎn)喂養(yǎng)的小鼠紅細(xì)胞數(shù)量和白細(xì)胞數(shù)量
5、接近對照組。
三、分子信標(biāo)CdSe QDs-DNA-Dabcly的構(gòu)建及光學(xué)性能分析
以羧基修飾的CdSe QDs與氨基修飾的單鏈DNA反應(yīng)合成了分子信標(biāo),并且分別測量了CdSe QDs、CdSe QDs-ssDNA分子信標(biāo)以及CdSe QDs-ssDNA分子信標(biāo)與靶鏈共聚物的熒光強(qiáng)度,結(jié)果顯示,由于熒光共振能量轉(zhuǎn)移機(jī)制的存在,連接單鏈DNA的CdSe QDs熒光強(qiáng)度驟減,而當(dāng)CdSe QDs-ssDNA分子信標(biāo)與靶
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