AEE在肺栓塞及血瘀動物模型中的抗血栓作用及其抗血小板聚集機制.pdf

1、伴隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展，貓、狗等伴侶動物的壽命明顯延長，而年齡依賴性的血栓逐漸成為老年伴侶動物的“殺手”，但當前尚未開發(fā)出寵物專用的抗血栓藥物。阿司匹林丁香酚酯(Aspinn eugenol ester,AEE)是自主合成的一種解熱、鎮(zhèn)痛、消炎藥，研究證實其也具有顯著的抗血栓作用。本研究通過研究AEE對肺栓塞小鼠的保護作用及其在大鼠血瘀模型中的抗血栓作用，進一步確證AEE對不同模型的抗血栓作用，基于血小板聚集被證實為血栓形成的關鍵因素，擬

2、探討對AEE的抗血小板聚集機制。
　　1、使用鹽酸腎上腺素和膠原誘導小鼠肺部形成血栓，制備小鼠肺栓塞模型。通過蘇木精-伊紅染色法(hematoxyhin-eosin staining，HE)染色的組織切片顯示肺栓塞小鼠肺部存在明顯的血栓形成，伴隨著肺泡壁毛細血管充血、水腫，證明小鼠肺栓塞模型成功制備。AEE能夠一定程度地升高肺栓塞小鼠存活率，并顯著降低肺栓塞小鼠肺系數(shù)。結(jié)果表明，AEE對肺栓塞小鼠具有一定的保護作用。
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3、、通過腎上腺素和冰水制備出大鼠血瘀模型，AEE能夠顯著升高血瘀大鼠血液中的凝血酶原時間、部分活化凝血活酶時間、凝血酶時間、血小板數(shù)目及血小板在血液中的百分比，并顯著降低血液中的纖維蛋白原含量;AEE能夠顯著降低血瘀大鼠血液的全血粘度、血漿粘度，降低血漿中血栓素B2(thromboxane B2，TXB2)含量，升高血漿中6-酮-前列腺素F1。(6-keto-PGF1α)含量。結(jié)果說明，AEE在血瘀模型中有著良好的抗血栓作用。
　　

4、3、體外從健康大鼠血液中提取血小板，通過血小板激動劑誘導血小板聚集，研究AEE抗血小板聚集的作用機制。AEE對血小板中乳酸脫氫酶(LDH)含量無顯著影響，且AEE的抗血小板聚集作用與其對血小板的毒性無關;AEE能夠顯著降低血小板ATP和鈣離子釋放及P選擇素(P-selectin)表達，抑制胞內(nèi)CD40L蛋白、蛋白激酶B(Akt)、細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶2(ERK2)和應激活化蛋白激酶1(JNK1)的表達，恢復Sirt1蛋白的表達，但對p38

5、蛋白、絲氨酸157位點磷酸化的血管舒張劑激活磷蛋白(VA SPSer157)和絲氨酸239位點磷酸化的血管舒張劑激活磷蛋白(VASPSer239)的表達以及胞內(nèi)環(huán)磷酸腺昔(Cyclic Adenosine monophosphate，cAMP)及胞內(nèi)環(huán)磷酸烏苷(cyclic guanosinc monophosphate，c GMP)含量無影響。結(jié)果表明，AEE通過抑制磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、絲裂原活化蛋白激