阿托伐他汀的抗血小板聚集作用依賴于血小板濃度.pdf

1、目的:冠心病是嚴(yán)重危害人類健康的常見病，隨著人們生活水平的不斷提高，冠心病的發(fā)病率和死亡率逐年升高，并且呈現(xiàn)年輕化的趨勢，而血小板活化在冠心病的發(fā)生、發(fā)展中起著關(guān)鍵作用。目前，環(huán)氧合酶抑制劑阿司匹林、二磷酸腺苷(ADP)受體拮抗劑氯吡格雷、GPⅡb/Ⅲa受體拮抗劑替羅非班等抗血小板藥物在冠心病治療中療效確切。近年來，他汀類藥物作為強(qiáng)有效的膽固醇合成抑制劑，通過強(qiáng)化降脂可顯著降低冠心病患者心肌梗死、卒中和心源性死亡等心血管不良事件的發(fā)生率

2、，因此越來越受到臨床醫(yī)師的廣泛關(guān)注。許多研究表明，他汀類藥物不僅能顯著降低血漿膽固醇水平，并且具有抑制泡沫細(xì)胞生成、穩(wěn)定粥樣斑塊、抗炎、改善血管內(nèi)皮功能以及抗血小板和抗栓作用即他汀的多效性。其中，他汀類藥物的抗血小板作用對冠心病尤其是急性冠脈綜合征(ACS)患者具有重要意義，但尚未得到確切證實。還有一些研究表明，他汀類藥物不僅能顯著降低高膽固醇血癥患者心血管不良事件的發(fā)生率，并且能夠降低血脂正常群體的心血管疾病的發(fā)病率[6-8]，這說明

3、他汀類藥物的心血管保護(hù)作用與其降低膽固醇的作用可能無直接關(guān)系，而是通過其多效性實現(xiàn)的。但是上述研究結(jié)果大多來自體內(nèi)試驗，存在混雜因素不易控制等缺陷，因此他汀類藥物是否具有直接的抗血小板作用以及機(jī)制尚未得到確切證實。
　　本課題選取阿托伐他汀鈣，將126人份健康人血小板原漿稀釋為生理邊界值濃度(100×109/L和300×109/L)和高濃度(600×109/L)的血小板原漿，與不同濃度的阿托伐他汀鈣體外孵育，通過檢測血小板聚集率與

4、聚集斜率，觀察阿托伐他汀鈣對不同濃度的血小板原漿的血小板聚集率是否有直接的抑制作用，為伴或不伴有高膽固醇血癥的冠心病患者應(yīng)用他汀類藥物提供客觀依據(jù)。
　　方法:研究對象為新鮮機(jī)采健康人血小板原漿共126人份，血小板濃度為(960～1280)×109/L，由河北省血液中心提供。其納入標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)均嚴(yán)格按照國家獻(xiàn)血法的標(biāo)準(zhǔn)。用生理鹽水將血小板原漿稀釋為100×109/L組（39人份）、300×109/L組(42人份)和600×109

5、/L組（45人份），取不同濃度的血小板分別制備成空白對照組（CN組）、實驗對照組(CD組)以及阿托伐他汀鈣終濃度分別為10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L的實驗組（C1-3組），于血小板采集后2小時內(nèi)用全血電阻抗法檢測血小板聚集率及斜率。誘導(dǎo)劑為二磷酸腺苷(ADP)（10μmol/L）、花生四烯酸(AA)(0.5mmol/L)、膠原(2μg/mL)及腎上腺素(EP)(1mg/mL)。
　　數(shù)據(jù)采用SPSS16

6、.0進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料服從正態(tài)分布時用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，不服從正態(tài)分布時采用中位數(shù)（四分位數(shù)間距）表示，即M(QR)。正態(tài)分布時采用單因素方差分析，不服從正態(tài)分布時組間比較采用多個相關(guān)樣本的秩和檢驗。P＜0.05認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)果:
　　1不同濃度的阿托伐他汀鈣對濃度為100×109/L的健康人血小板原漿血小板聚集率的影響
　　1.1阿托伐他汀對ADP（10μmol/L）誘導(dǎo)血小板聚集的影響

7、:CN、 CD、C1-3組的血小板聚集率分別為3.50(1)ohms、3.00(1)ohms、3.00(1)ohms、3.00(2) ohms及3.14±1.06ohms;各組間差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.674)。聚集斜率分別為2.00(1)ohms/min、2.00(2) ohms/min、2.00(1)ohms/min、2.00(1)ohms/min及2.00(1)ohms/min;各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.572)。

8、>　　1.2阿托伐他汀對AA(0.5mmol/L)誘導(dǎo)的血小板聚集的影響:CN、CD、C1-3組的血小板聚集率分別為3.56±1.15ohms、3.50(1) ohms、3.00(1)ohms、3.00(2) ohms及3.00(2) ohms;各組間差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.200)。聚集斜率分別為1.50(1)ohms/min、1.50(1)ohms/min、1.00(1)ohms/min、1.00(1)ohms/min及1.00

9、(1)ohms/min;各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.993）。
　　1.3阿托伐他汀對膠原（2μg/mL）誘導(dǎo)的血小板聚集的影響:CN、 CD、C1-3組的血小板聚集率分別為9.00(2) ohms、8.50±1.78ohms、8.00(3) ohms、8.00(2) ohms及8.00(3)ohms;各組間差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.362)。聚集斜率分別為2.00(1)ohms/min、2.00(1)ohms/min、2.

10、00(1)ohms/min、2.00(0) ohms/min及2.00(0)ohms/min;各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.986)。
　　1.4阿托伐他汀對EP(1mg/mL)誘導(dǎo)的血小板聚集的影響:CN、 CD、 C1-3組的血小板聚集率分別為4.00(2)ohms、4.00(1)ohms、4.00(1)ohms、4.00(3) ohms及4.00(2) ohms;各組間差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.266)。聚集斜率分別為2

11、.00(1)ohms/min、2.00(1)ohms/min、2.00(1)ohms/min、2.00(1)ohms/min及1.50(1)ohms/min;各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.915）。
　　2不同濃度的阿托伐他汀鈣對濃度為300×109/L的健康人血小板原漿血小板聚集率的影響
　　2.1阿托伐他汀對ADP（10μmol/L）誘導(dǎo)血小板聚集的影響:CN、 CD、 C1-3組的血小板聚集率分別為11.00±1.8

12、5ohms、10.97±1.71ohms、11.00(2)ohms、10.42±1.91ohms及10.00(3) ohms;各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.172)。聚集斜率分別為4.00(2) ohms/min、4.00(2) ohms/min、4.00(2) ohms/min、4.00(1)ohms/min及4.00(1)ohms/min;各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.068)。
　　2.2阿托伐他汀對AA(0.5mmol

13、/L)誘導(dǎo)的血小板聚集的影響:CN、CD、C1-3組的血小板聚集率分別為12.06±1.03ohms、12.00(2) ohms、12.00(2)ohms、12.00(2) ohms及11.21±1.51 ohms;各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.275)。聚集斜率分別為:10.00(1)ohms/min、10.33±1.35ohms/min、9.83±1.27ohms/min、9.72±1.60ohms/min及9.68±1.46oh

14、ms/min;各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.341）。
　　2.3阿托伐他汀對膠原（2μg/mL）誘導(dǎo)的血小板聚集的影響:CN、 CD、C1-3組的血小板聚集率分別為17.00±2.02ohms、17.14±1.36ohms、16.29±1.68ohms、15.03±1.62ohms及14.36±2.15ohms;差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。用SNK-q法兩兩比較，發(fā)現(xiàn)CN與CD組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義;CN、 CD組與C1-

15、3組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;阿托伐他汀鈣低濃度組與高濃度組間有統(tǒng)計學(xué)差異，但二者與阿托伐他汀鈣中濃度組間均無統(tǒng)計學(xué)差異。聚集斜率分別為15.64±1.65 ohms/min、15.55±1.57ohms/min、15.00±2.02ohms/min、14.23±1.75ohms/min及13.86±1.98ohms/min;差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.001)。用SNK-q法兩兩比較，發(fā)現(xiàn)CN與CD組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義;CN、 CD組與C1-

16、3組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;阿托伐他汀鈣低、中、高濃度組間無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　2.4阿托伐他汀對EP(1mg/mL)誘導(dǎo)的血小板聚集的影響:CN、CD、 C1-3組的血小板聚集率分別為15.97±1.66ohms、15.50±1.48ohms、15.37±2.10ohms、14.32±2.39ohms及13.93±2.82ohms;差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.002）。用SNK-q法兩兩比較，發(fā)現(xiàn)CN與CD組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義;CN、C

17、D組與C1-3組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;阿托伐他汀鈣低、中、高濃度組間無統(tǒng)計學(xué)差異。聚集斜率分別為19.10±2.10ohms/min、17.98±2.81 ohms/min、17.44±3.61 ohms/min、16.33±3.87ohms/min及15.46±4.06ohms/min;差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.001)。用SNK-q法兩兩比較，發(fā)現(xiàn)CN與CD組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義;CN、 CD組與C1-3組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;阿托伐他汀

18、鈣低、中、高濃度組間無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　3不同濃度的阿托伐他汀鈣對濃度為600×109/L的健康人血小板原漿血小板聚集率的影響
　　3.1阿托伐他汀對ADP（10μmol/L）誘導(dǎo)血小板聚集的影響:CN、CD、 C1-3組的血小板聚集率分別為22.63±2.14ohms、22.58±1.79ohms、22.35±2.70ohms、21.21±2.30ohms及19.59±1.85ohms;差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。用

19、SNK-q法兩兩比較，發(fā)現(xiàn)CN與CD組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義;CN、CD組與C1-3組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;阿托伐他汀鈣低、中、高濃度組間亦有統(tǒng)計學(xué)差異。聚集斜率分別為21.34±2.62ohms/min、20.77±2.36ohms/min、20.09±2.53ohms/min、19.03±1.94ohms/min及18.72±2.20ohms/min;差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。用SNK-q法兩兩比較，發(fā)現(xiàn)CN與CD組間差異無統(tǒng)計學(xué)

20、意義;CN、CD組與C1-3組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;阿托伐他汀鈣低濃度組與高濃度組間有統(tǒng)計學(xué)差異，但二者與阿托伐他汀鈣中濃度組間均無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　3.2阿托伐他汀對AA（0.5mmol/L）誘導(dǎo)的血小板聚集的影響:CN、CD、C1-3組的血小板聚集率分別為16.60±2.77ohms、16.33±2.66ohms、15.50(4)ohms、15.06±2.84ohms及14.00(3)ohms;差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.03)。

21、用Mann-Whitney U法進(jìn)行兩兩比較（調(diào)整檢驗水準(zhǔn)α為0.005），發(fā)現(xiàn)CN與CD組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義;CN、 CD組與C1-3組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;阿托伐他汀鈣低、中、高濃度組間無統(tǒng)計學(xué)差異。聚集斜率分別為21.27±2.02ohms/min、21.07±2.28ohms/min、20.71±2.37ohms/min、19.41±1.47ohms/min及18.00(2) ohms/min;差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。用

22、Mann-Whitney U法進(jìn)行兩兩比較（調(diào)整檢驗水準(zhǔn)α為0.005），發(fā)現(xiàn)CN與CD組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義;CN、 CD組與C1-3組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;阿托伐他汀鈣低濃度組與高濃度組間有統(tǒng)計學(xué)差異，但二者與阿托伐他汀鈣中濃度組間均無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　3.3阿托伐他汀對膠原（2μg/mL）誘導(dǎo)的血小板聚集的影響:CN、 CD、C1-3組的血小板聚集率分別為23.53±1.98ohms、22.43±1.75ohms、22.06±2

23、.19ohms、21.39±2.57ohms及20.30±1.94ohms;差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。用SNK-q法兩兩比較，發(fā)現(xiàn)CN與CD組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義;CN、CD組與C1-3組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;阿托伐他汀鈣低濃度組與高濃度組間有統(tǒng)計學(xué)差異，但二者與阿托伐他汀鈣中濃度組間均無統(tǒng)計學(xué)差異。聚集斜率分別為:26.00(2)ohms/min、26.00±1.55ohms/min、25.00(3)ohms/min、24.45±

24、1.95ohms/min及22.00(4) ohms/min;差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。用Mann-Whitney U法進(jìn)行兩兩比較（調(diào)整檢驗水準(zhǔn)α為0.005），發(fā)現(xiàn)CN與CD組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義;CN、CD組與C1-3組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;阿托伐他汀鈣低濃度組與高濃度組間有統(tǒng)計學(xué)差異，但二者與阿托伐他汀鈣中濃度組間均無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　3.4阿托伐他汀對EP(1mg/mL)誘導(dǎo)的血小板聚集的影響:CN、CD、C1-3組

25、的血小板聚集率分別為20.68±2.30ohms、20.63±1.86ohms、19.60±2.16ohms、18.97±1.83ohms及17.76±1.66ohms;差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。用SNK-q法兩兩比較，發(fā)現(xiàn)CN與CD組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義;CN、 CD組與C1-3組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;阿托伐他汀鈣低濃度組與高濃度組間有統(tǒng)計學(xué)差異，但二者與阿托伐他汀鈣中濃度組間均無統(tǒng)計學(xué)差異。聚集斜率分別為24.76±2.01oh

26、ms/min、24.63±1.77ohms/min、22.93±2.68ohms/min、21.94±1.92ohms/min及20.90±3.08ohms/min;差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。用SNK-q法兩兩比較，發(fā)現(xiàn)CN與CD組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義;CN、 CD組與C1-3組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;阿托伐他汀鈣低濃度組與高濃度組間有統(tǒng)計學(xué)差異，但二者與阿托伐他汀鈣中濃度組間均無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)論:阿托伐他汀對血小板聚集的