不同旋光性蛋氨酸對(duì)北京鴨生物學(xué)效價(jià)及毒性的比較研究.pdf

1、本論文通過(guò)四個(gè)試驗(yàn)研究了L-蛋氨酸和DL-蛋氨酸及添加水平對(duì)北京鴨生長(zhǎng)性能、屠宰性能、血漿生化和血常規(guī)指標(biāo)的影響，從而估測(cè)L-Met相對(duì)于DL-Met的生物學(xué)效價(jià)，并確定肉鴨蛋氨酸需要量和最大安全限量，并利用RNA-Seq技術(shù)研究了過(guò)量蛋氨酸對(duì)肉鴨肝臟轉(zhuǎn)錄組的影響，以期為肉鴨生產(chǎn)中晶體蛋氨酸的合理使用和蛋氨酸對(duì)肉鴨毒性作用的分子機(jī)制研究提供理論依據(jù)。
　　試驗(yàn)一采用玉米-花生粕型飼糧比較了生長(zhǎng)前期北京鴨飼糧中L-Met和DL-Me

2、t的相對(duì)生物學(xué)效價(jià)。本試驗(yàn)采用2×7+1雙因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，試驗(yàn)設(shè)1個(gè)基礎(chǔ)飼糧對(duì)照組（蛋氨酸029％,代謝能1256MJ/Kg，粗蛋白2215％），7個(gè)L-Met或DL-Met添加組(003％，006％，010％，014％，019％，024％和029％)，共15個(gè)處理組。選取720只1日齡健康雄性北京鴨隨機(jī)分為15個(gè)處理，每個(gè)處理8個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6只鴨。試驗(yàn)期21d。結(jié)果表明:與基礎(chǔ)飼糧組相比，飼糧添加適量L-Met和DL-Met

3、均能顯著提高北京鴨平均體重(ABG)、日增重(ADG)、日采食量(ADFI)和腿肌率(P＜005)。L-Met組，隨飼糧蛋氨酸水平升高，肉鴨ABG和ADG呈現(xiàn)先升高后降低的規(guī)律，而DL-Met組肉鴨ABG和ADG則先升高而后趨于穩(wěn)定。采用二次曲線模型，以ADG為評(píng)價(jià)指標(biāo)，以L-Met和DL-Met為蛋氨酸源時(shí)，獲得的1～21日齡北京鴨飼糧蛋氨酸需要量分別為046％和054％，T檢驗(yàn)表明以L-Met為蛋氨酸源時(shí)肉鴨對(duì)蛋氨酸的需要量顯著低于

4、以DL-Met為蛋氨酸源。根據(jù)飼糧蛋氨酸總水平為029％,032％，035％，039％，043％和048％處理組，以ADG為評(píng)價(jià)指標(biāo)，利用線性斜率比法，估測(cè)L-Met相對(duì)于DL-Met的生物學(xué)效價(jià)為134％。
　　試驗(yàn)二采用玉米-花生粕型飼糧比較了生長(zhǎng)后期北京鴨飼糧中L-Met與DL-Met的相對(duì)生物學(xué)效價(jià)。本試驗(yàn)采用2×7+1雙因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，試驗(yàn)設(shè)1個(gè)基礎(chǔ)飼糧對(duì)照組（蛋氨酸022％，代謝能1275MJ/Kg，粗蛋白181

5、8％），7個(gè)L-Met或DL-Met添加組(003％，006％，009％，013％，017％,022％和027％)，共15個(gè)處理組。選取720只15日齡健康北京鴨隨機(jī)分為15個(gè)處理，每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8只鴨。試驗(yàn)期21d。結(jié)果表明:與基礎(chǔ)飼糧組相比，飼糧添加適量L-Met和DL-Met均能顯著提高北京鴨生長(zhǎng)性能和第四主翼羽長(zhǎng)度(P＜005)，有顯著提高胸肌率的趨勢(shì)(005＜P＜010)。采用二次曲線模型，以ADG為評(píng)價(jià)指標(biāo)，以L

6、-Met和DL-Met為蛋氨酸源時(shí)，獲得的15～35日齡北京鴨飼糧蛋氨酸需要量分別為041％和037％，但T檢驗(yàn)表明二者差異不顯著。根據(jù)飼糧蛋氨酸總水平為022％，025％，028％，031％，035％和039％處理組，以ADG為評(píng)價(jià)指標(biāo)，利用線性斜率比法，估測(cè)L-Met相對(duì)于DL-Met的生物學(xué)效價(jià)為125％。
　　試驗(yàn)三采用玉米-豆粕型飼糧比較了生長(zhǎng)前期北京鴨飼糧中過(guò)量的L-Met和DL-Met的相對(duì)生物學(xué)效價(jià)。本試驗(yàn)采用2×

7、5+1雙因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，試驗(yàn)設(shè)1個(gè)基礎(chǔ)飼糧對(duì)照組（蛋氨酸047％，代謝能1203MJ/Kg，粗蛋白1899％），5個(gè)L-Met或DL-Met添加組(025％，050％，075％，100％和125％)，共11個(gè)處理組。選取492只8日齡健康北京鴨隨機(jī)分為11個(gè)處理，每個(gè)處理7個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6只鴨。試驗(yàn)期21d。結(jié)果表明:與基礎(chǔ)飼糧對(duì)照組相比，飼糧蛋氨酸過(guò)量時(shí)會(huì)降低北京鴨ABG、ADG、ADFI、料重比、胸肌率和腹脂率(P＜005)

8、;顯著升高鴨血漿中高半胱氨酸、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素、乳酸脫氫酶、平均紅細(xì)胞體積和紅細(xì)胞體積分布寬度(P＜005)，而顯著降低血紅蛋白、平均血紅蛋白含量和平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(P＜005)，并有降低紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的趨勢(shì)（005＜P＜010）。采用折線模型，以日增重為評(píng)價(jià)指標(biāo)，以L-Met和DL-Met為蛋氨酸源時(shí)，獲得的飼糧蛋氨酸最大安全限量分別為086％和089％，T檢驗(yàn)表明二者無(wú)顯著差異。以日增重和日采食量的抑制程度為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用線性

9、模型斜率比法，估測(cè)L-Met相對(duì)于DL-Met的生物學(xué)效價(jià)分別是100％和102％。
　　試驗(yàn)四利用轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)探究過(guò)量蛋氨酸對(duì)北京鴨產(chǎn)生毒性作用的分子機(jī)制。本試驗(yàn)是在試驗(yàn)三的基礎(chǔ)上從基礎(chǔ)飼糧組(047％)和蛋氨酸過(guò)量組(172％)中分別選取試驗(yàn)鴨各3只，提取肝臟總RNA進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析。結(jié)果表明，根據(jù)|log2Fold Change|≥058且P-value≤005，共篩選出1082個(gè)差異表達(dá)基因，表達(dá)上調(diào)基因467個(gè)，表達(dá)下

10、調(diào)基因615個(gè)，這些基因主要與脂質(zhì)代謝、能量代謝和線粒體凋亡有關(guān);GO功能富集分析顯示，差異表達(dá)基因主要富集在脂質(zhì)代謝、免疫反應(yīng)和線粒體凋亡等生物學(xué)過(guò)程;KEGG Pathway分析顯示，差異表達(dá)基因主要富集在代謝通路、鈣離子信號(hào)通路、炎癥因子與其受體相互作用和PPAR信號(hào)通路等代謝通路。
　　綜上，飼糧中適量水平的L-Met和DL-Met均能提高生長(zhǎng)前期和生長(zhǎng)后期北京鴨的生長(zhǎng)性能和胴體品質(zhì)，而過(guò)量的L-Met和DL-Met均會(huì)抑