重復性眶周交流電刺激對單眼剝奪小鼠視皮層可塑性的作用研究.pdf

1、目的:
　　利用圖形視覺誘發(fā)電位(PVEP)和電鏡觀察重復性眶周交流電刺激對關(guān)鍵期內(nèi)單眼剝奪小鼠初級視皮層功能和形態(tài)學的影響。
　　方法:
　　P26 C57小鼠30只，分三組：對照組不做任何處理，單眼剝奪組于右眼縫合眼瞼3天后打開，電刺激組于右眼縫合眼瞼3天后打開給予眶周交流電刺激3天，其余飼養(yǎng)條件相同，三組均行PVEP檢測。采用圖形棋盤格刺激，空間頻率為0.07 cpd，時間頻率為lHz。
　　從上述3組中每

2、組隨機取兩只，行心臟灌注，先用溫熱0.9％生理鹽水沖洗干凈血液，直至從右心房流出澄清生理鹽水，再用4%多聚甲醛灌注10min，至四肢伸展，僵直，斷頭取腦，分別切取左，右半球視皮層，即刻投入3%多聚甲醛+2.5%戊二醛混合液中送檢。標本先后經(jīng)2.5%戊二醛固定液，1%四氧化鋨固定液固定；上升梯度乙醇脫水；環(huán)氧丙烷過渡， Epon812包埋；以 LEICA ULTRACUT-R超薄切片機半薄切片定位后做超薄切片，厚度50nm±；醋酸鈾-檸檬

3、酸鉛雙染色。HITACHI-7500透射電子顯微鏡觀察；Megaview數(shù)字化電鏡攝影系統(tǒng)射片。采用圖像分析軟件對三組小鼠初級視皮層突觸的以下參數(shù)進行定量分析比較：突觸界面曲率，突觸間隙寬度，突觸后致密物（PSD）厚度，突觸活性區(qū)長度。
　　結(jié)果：
　　1.重復性眶周交流電刺激對單眼剝奪小鼠圖形視覺誘發(fā)電位(PVEP)的作用
　　正常組右眼峰值大于左眼（t=5.472，p=0.000），潛伏期短于左眼（t=-3.550

4、， p=0.002），單眼剝奪組與正常組相比右眼峰值變?。╰=-7.976，p=0.000），潛伏期變長（t=2.391， p=0.028），左眼相反（t=2.500， p=0.022；t=-4.176， p=0.001），電刺激組與單眼剝奪組相比右眼峰值變大（t=4.774，p=0.000），潛伏期變短（t=-2.437，p=0.025），左眼峰值和潛伏期變化均不明顯（t=0.169， p=0.868，t=0.870，p=0.396）

5、。C/I比值正常組為1.96±0.82,單眼剝奪組為0.54±0.18，電刺激組為1.11±0.41，單眼剝奪組較正常組C/I比值降低，差異有統(tǒng)計學意義（t=-5.309，p=0.000）；電刺激組較單眼剝奪組C/I比值升高,差異有統(tǒng)計學意義（t=4.020，p=0.001）。
　　2.重復性眶周交流電刺激對單眼剝奪小鼠神經(jīng)元及突觸超微結(jié)構(gòu)的影響
　　正常組神經(jīng)元細胞胞核圓，核周間隙正常，長而直的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，包裹核糖體，組成

6、尼氏體，高爾基體三至八層空腔囊泡狀，線粒體膜清晰，嵴向內(nèi)凹陷，基質(zhì)排列整齊；單眼剝奪組細胞核核膜皺縮，核周間隙腫脹，尼氏體結(jié)構(gòu)消失，高爾基體腫脹空化，線粒體膜不清，基質(zhì)排列紊亂，可見溶酶體吞噬大量壞死細胞物質(zhì)；電刺激組細胞核核膜趨于飽滿，形態(tài)尚不圓，核周間隙恢復正常，可見高爾基體及尼氏體，細胞質(zhì)中散在大量核糖體，線粒體形態(tài)趨于正常，吞噬了損傷細胞殘片的溶酶體仍然存在。
　　與單眼剝奪組比較，電刺激后，突觸后致密物厚度變厚（t=3.

7、291，p=0.002），突觸界面曲率減?。╰=-2.969，p=0.005）。哭型突觸減少，笑型突觸增加（χ2=11.379，p=0.001）。
　　視皮層17區(qū)正常組以平直型突觸為主，單眼剝奪組以哭型突觸為主，電刺激組以平直型突觸為主。
　　結(jié)論：
　　1.經(jīng)重復性眶周交流電刺激后小鼠剝奪眼反應較單眼剝奪組增強，C/I比值增大，眼優(yōu)勢向右側(cè)移動；
　　2.經(jīng)重復性眶周交流電刺激后小鼠視皮層神經(jīng)元突觸結(jié)構(gòu)活性較