維生素D受體基因多態(tài)性及血清25-羧維生素D水平與炎癥性腸病的關(guān)系.pdf

1、目的:炎癥性腸病(IBD)主要包括潰瘍性結(jié)腸炎(UC)和克羅恩病(CD)，是一組病因至今不明的慢性非特異性腸道炎癥性疾病?，F(xiàn)多數(shù)學(xué)者認(rèn)為IBD主要是由于遺傳、環(huán)境、免疫等復(fù)雜因素綜合作用于遺傳易感者，使機(jī)體針對自身腸道菌群產(chǎn)生異常免疫應(yīng)答，最終導(dǎo)致腸組織反復(fù)發(fā)生難以控制的炎癥反應(yīng)。研究證實(shí)維生素D受體(VDR)信號對先天及后天免疫都具有重要的調(diào)節(jié)功能，并與多種自身免疫性疾病密切相關(guān)。據(jù)最新報道VDR基因多態(tài)性和血清25-羥維生素D[25

2、(OH)D]水平不僅是調(diào)控VDR信號的關(guān)鍵因素，還對結(jié)核病、前列腺癌等疾病具有協(xié)同影響?？偨Y(jié)目前有關(guān)VDR基因多態(tài)性與IBD易感性的研究報道，其結(jié)論并非完全一致;并且血清25(OH)D水平對IBD的影響亦無統(tǒng)一定論。因此本研究擬在浙江漢族人群中同時探討VDR基因多態(tài)性及血清25(OH)D水平與IBD易感性的關(guān)系，并構(gòu)建遺傳-環(huán)境交互模型分析它們在IBD中的協(xié)同作用。
　　第一部分 潰瘍性結(jié)腸炎患者中VDR基因多態(tài)性及血清25(OH

3、)D水平分析
　　方法：收集404例UC患者和612名健康對照者，采用SnapShot技術(shù)檢測VDR(FokⅠ、BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ)4種單核苷酸多態(tài)性(SNP)。從中隨機(jī)選取75例UC患者和120名年齡、性別相匹配的同期對照者，采用電化學(xué)發(fā)光法(ECLIA)檢測血清25(OH)D水平。
　　結(jié)果：經(jīng)Bonferroni校正后，與對照組相比較，UC組中VDR(FokⅠ、BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ)4個位點(diǎn)的突變等位

4、基因和基因型頻率均無統(tǒng)計學(xué)差異(P均＞0.0125)。分層分析發(fā)現(xiàn)輕中度UC患者中FokⅠ的突變等位基因(C)和基因型(TC+CC)頻率顯著高于重度UC患者(54.37％比37.70％，95％CI:1.325-2.925，P=0.001;81.92％比55.74％，95％CI:2.025-6.398，P＜0.001)。采用Haploview4.2和R語言軟件包進(jìn)行連鎖不平衡和單倍型分析，結(jié)果顯示BsmⅠ、ApaⅠ和TaqⅠ緊密連鎖，UC

5、組中AAC單倍型頻率顯著低于對照組(3.58％比6.01％，95％CI:0.374-0.928，P=0.012)。UC組中血清25(OH)D平均水平顯著低于對照組[(19.26±6.78)比(21.79±7.32) ng/ml，P=0.017]。并且輕中度UC患者中血清25(OH)D平均水平顯著高于重度患者[(21.38±5.98)比(16.56±6.86) ng/ml，P=0.002];廣泛結(jié)腸炎患者中血清25(OH)D平均水平顯著低

6、于遠(yuǎn)端結(jié)腸炎患者[（15.56±6.91）比(20.90±6.10) ng/ml，P=0.001]。線性回歸分析發(fā)現(xiàn)UC患者中血清25(OH)D平均水平與血紅蛋白呈獨(dú)立正相關(guān)(β=0.499，P＜0.001)，而與C-反應(yīng)蛋白及白細(xì)胞計數(shù)呈獨(dú)立負(fù)相關(guān)(β=-0.346，P＜0.001;β=-0.291，P=0.002)。采用Logistic回歸構(gòu)建基因-環(huán)境交互模型，結(jié)果顯示BsmⅠ突變基因型(GA+AA)是UC的獨(dú)立保護(hù)因素(95％C

7、I:0.122-0.885，P=0.028)，F(xiàn)okⅠ突變基因型(TC+CC)與25(OH)D缺乏(＜20 ng/ml)在UC中存在交互作用(95％CI:1.236-3.467，P=0.006)。
　　小結(jié)：VDR(FokⅠ、BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ)基因多態(tài)性及血清25(OH)D水平與UC顯著相關(guān)，BsmⅠ基因突變是UC的獨(dú)立保護(hù)因素，F(xiàn)okⅠ突變基因型(TC+CC)與25(OH)D缺乏可能對UC的易感性產(chǎn)生協(xié)同影響。

8、>　　第二部分 VDR基因多態(tài)性及血清25(OH)D水平與克羅恩病的關(guān)系
　　方法：在297例CD患者和446名健康對照者中，采用SnapShot技術(shù)檢測VDR(FokⅠ、BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ)4個SNP位點(diǎn)。從中隨機(jī)選取124例CD患者和188名年齡、性別相匹配的同期對照者，采用ECLIA檢測血清25(OH)D水平。
　　結(jié)果：經(jīng)Bonferroni校正后，與對照組相比較，CD組中BsmⅠ的突變等位基因(A)和基因

9、型(GA+AA)頻率顯著降低(3.70％比7.51％，95％CI:0.289-0.776，P=0.002;7.41％比14.80％，95％CI:0.277-0.765，P=0.002); TaqⅠ的突變等位基岡(C)及基因型(TC+CC)頻率亦顯著降低(4.21％比7.62％，95％CI:0.333-0.852，P=0.008;8.42％比14.57％，95％CI:0.331-0.877，P=0.012)。單倍型分析發(fā)現(xiàn)BsmⅠ、Apa

10、Ⅰ和TaqⅠ緊密連鎖，CD組中AAC單倍型頻率顯著低于對照組(3.14％比6.46％，95％CI:0.273-0.815，P=0.004)。CD組中血清25(OH)D平均水平顯著低于對照組[（15.46±8.11）比(21.64±9.45) ng/ml，P＜0.001]。線性回歸分析提示CD患者中血清25(OH)D平均水平與CD疾病活動指數(shù)(β=-0.829，P＜0.001)、血小板計數(shù)(β=-0.253，P＜0.001)和中性粒細(xì)胞百

11、分比(β=-0.136，P=0.005)呈獨(dú)立負(fù)相關(guān)。經(jīng)Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)ApaⅠ突變基因型(CA+AA)和25(OH)D缺乏是CD的獨(dú)立危險因素(95％CI:1.300-6.211，P=0.009;95％CI:2.983-19.261，P＜0.001);25(OH)D缺乏分別與FokⅠ突變基因型(TC+CC)、ApaⅠ突變基因型(CA+AA)及TaqⅠ突變基因型(TC+CC)存在交互作用(95％CI:0.194-0.906,

12、P=0.027;95％CI:0.111-0.855,P=0.024;95％CI:1.082-31.538，P=0.040)。
　　小結(jié)：VDR(BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ)基因多態(tài)性及血清25(OH)D水平與CD密切相關(guān);ApaⅠ突變基因型(CA+AA)和25(OH)D缺乏是CD的獨(dú)立危險因素;VDR(FokⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ)基因突變與25(OH)D缺乏可能對CD的易感性產(chǎn)生協(xié)同影響。
　　結(jié)論:VDR基因突變及血清