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1、研究目的:低氧和運(yùn)動都會使機(jī)體產(chǎn)生氧化應(yīng)激。HIF-1α在機(jī)體缺氧條件下起中樞調(diào)節(jié)作用。Nrf2是機(jī)體氧化還原平衡的主要調(diào)節(jié)因子。HIF-1α增加是否會影響Nrf2及抗氧化蛋白表達(dá),進(jìn)而影響體內(nèi)氧化還原狀態(tài),目前還不清楚。本實(shí)驗(yàn)通過對野生鼠和HIF-1α轉(zhuǎn)基因鼠在安靜和運(yùn)動兩種情況下,骨骼肌細(xì)胞中Nrf2及抗氧化蛋白表達(dá)的檢測,探討HIF-1α和運(yùn)動對骨骼肌中Nrf2與抗氧化蛋白表達(dá)的影響。
研究方法:野生鼠和HIF-1α轉(zhuǎn)基
2、因鼠各20只,根據(jù)體重,兩種鼠分為2組,每組10只,雌雄各半,分別為安靜組和運(yùn)動組,共4組。運(yùn)動組做一次性跑臺運(yùn)動,坡度10%,速度14m/min,運(yùn)動3小時。正式實(shí)驗(yàn)前三天,運(yùn)動組小鼠進(jìn)行20min適應(yīng)性的跑臺運(yùn)動。在整個運(yùn)動過程中未對動物使用任何電刺激。在運(yùn)動組完成運(yùn)動方案后,即刻取材。Western blot法測定骨骼肌胞漿蛋白中4-HNE、Keap1、Nrf2及抗氧化蛋白和骨骼肌核蛋白中Nrf2含量。
研究結(jié)果:1)野
3、生鼠的運(yùn)動組與安靜組相比,4-HNE、Keap1和HO-1胞漿蛋白表達(dá)顯著下降,Nrf2核蛋白含量顯著降低。2)轉(zhuǎn)基因鼠安靜組與野生鼠安靜組相比,4-HNE胞漿蛋白表達(dá)極顯著降低,SOD2胞漿蛋白表達(dá)顯著增加。3)轉(zhuǎn)基因鼠運(yùn)動組與安靜組相比,Keap1胞漿蛋白表達(dá)顯著下降,Nrf2和4-HNE胞漿蛋白表達(dá)極顯著增加,Nrf2核蛋白含量極顯著性增加,NQO1和SOD2極顯著增加,GPx-1極顯著降低;轉(zhuǎn)基因鼠運(yùn)動組與野生鼠運(yùn)動組相比,Nr
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