泄?jié)峤舛痉綄?duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠血清及腸粘膜EGF、NO、NOS的影響.pdf

1、目的：潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative Colitis，UC)是一種病因不明的發(fā)生在結(jié)腸的慢性非特異性炎癥性疾病，多發(fā)生于遠(yuǎn)端結(jié)腸，也可遍及全結(jié)腸，以糜爛、潰瘍?yōu)橹饕±碜兓?，以腹痛、腹瀉、粘液膿血便和里急后重為主要臨床表現(xiàn)。近年來(lái)，-隨著人們生活習(xí)慣和環(huán)境因素的改變，UC的發(fā)病率逐年升高，嚴(yán)重影響患者的學(xué)習(xí)、工作及生活。我們根據(jù)中醫(yī)“濁毒”理論及潰瘍性結(jié)腸炎病機(jī)，提出“泄?jié)嵘?，解毒祛瘀”之治療大法，選出經(jīng)驗(yàn)方泄?jié)峤舛痉?，通過動(dòng)物實(shí)

2、驗(yàn)，觀察泄?jié)峤舛痉綄?duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠血清及腸粘膜EGF、NO、NOS的影響，并與柳氮磺胺吡啶進(jìn)行療效比較，探討該方治療UC可能的作用機(jī)制，以期為UC的治療提供一定的理論及實(shí)踐依據(jù)。
　　方法：本研究采用三硝基苯磺酸(2，4，6-trinitrobenzene-sulfonicacid，TNBS)/乙醇聯(lián)合造模法誘導(dǎo)大鼠潰瘍性結(jié)腸炎動(dòng)物模型，取健康清潔級(jí)wistar大鼠45只，體重220-250g，雄性，隨機(jī)抽取8只作為空白組(BG

3、)，其余大鼠由肛門推入含TNBS100mg/kg的30％乙醇溶液，復(fù)制潰瘍性結(jié)腸炎的動(dòng)物模型。3天后，隨機(jī)抽取5只造模大鼠處死，取其結(jié)腸標(biāo)本，病理檢查確認(rèn)其有充血、水腫及典型潰瘍形成等一系列病理變化即為造模成功。將剩余造模大鼠隨機(jī)分為模型組(MG)、柳氮磺胺吡啶組(SG)、泄?jié)峤舛痉叫┝拷M(LG)、泄?jié)峤舛痉酱髣┝拷M(HG)4組，每組8只。BG、MG組用生理鹽水灌胃，SG、LG、HG組分別給予柳氮磺胺吡啶液0.3g/kg、泄?jié)峤舛痉剿?/p>

4、煎劑10.0g/kg、泄?jié)峤舛痉剿鍎?0.0g/kg灌胃，每日1次，連續(xù)治療14天，觀察其療效。實(shí)驗(yàn)從3個(gè)方面進(jìn)行研究探討：實(shí)驗(yàn)一觀察泄?jié)峤舛痉綄?duì)UC大鼠一般狀況及結(jié)腸組織病理學(xué)的影響。實(shí)驗(yàn)二分別采用放射性免疫技術(shù)及免疫組化技術(shù)檢測(cè)泄?jié)峤舛痉綄?duì)UC大鼠血清EGF含量及結(jié)腸組織EGF的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)三采用硝酸還原酶法檢測(cè)血清NO及結(jié)腸組織中NO含量；化學(xué)法檢測(cè)血清中NOS活性及NOS活性。采用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以P<0.05作

5、為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的判定標(biāo)準(zhǔn)。
　　結(jié)果：⑴一般狀況：MG組及各治療組大鼠與BG組相比均有不同改變，HG組大鼠的精神狀態(tài)、毛發(fā)光澤度、反應(yīng)情況、進(jìn)食、體質(zhì)量、大便性狀等情況均好于其它組，其中MG組情況最差。大鼠的疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)評(píng)分：BG組大鼠DAI評(píng)分較低，MG組大鼠DAI評(píng)分顯著增高，兩組相比有顯著差異性(P<0.05)。HG組、LG組、SG組與MG組相比大鼠DAI評(píng)分均明顯降低，均有非常顯著性差異(P<0.05)。HG組與

6、SG組相比，大鼠DAI評(píng)分降低，有非常顯著性差異(P<0.05)；SG組與LG組相比，大鼠DAI評(píng)分無(wú)顯著性差異(P>0.05)。結(jié)腸粘膜損傷指數(shù)(CMDI)評(píng)分：BG組大鼠CMDI評(píng)分較低，MG組大鼠CMDI評(píng)分顯著增高，兩組相比有顯著差異性(P<0.05)。與MG組相比，SG組、LG組、HG組大鼠CMDI評(píng)分明顯降低，均有顯著性差異(P<0.05)。與SG組相比，HG組大鼠CMDI評(píng)分明顯降低，有顯蓍性差異(P<0.05)；LG組與

7、SG組大鼠CMDI評(píng)分相比，無(wú)顯著性差異(P>0.05)。光鏡下結(jié)腸病理組織觀察：BG組大鼠結(jié)腸組織全層結(jié)構(gòu)清晰，無(wú)潰瘍、糜爛及充血，黏膜上皮細(xì)胞排列整齊，腸腺規(guī)則，杯狀細(xì)胞豐富，固有層可見毛細(xì)血管紋理；SG組與LG組結(jié)腸潰瘍較表淺，潰瘍旁上皮修復(fù)明顯，腺體增生活躍，隱窩、腸腺及間質(zhì)可見少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；HG組結(jié)腸粘膜上皮及腺管排列整齊，腺體增生活躍，杯狀細(xì)胞豐富，間質(zhì)充血水腫不明顯，隱窩、腸腺及間質(zhì)可見炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，其基本形態(tài)與BG組

8、相似。⑵放射性免疫法測(cè)定大鼠血清EGF含量：MG組與BG緝相比，兩組血清EGF含量無(wú)顯著性差異(P>0.05)；SG組與MG組相比，血清EGF含量升高，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有顯著性差異(P<0.05)。SG組與LG組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；HG組與SG組相比，血清EGF含量升高，差異有顯著性差異(P<0.05)；SG組與LG組相比，血清EGF含量升高，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有顯著性差異(P<0.05)。免疫組織化學(xué)法測(cè)定大鼠結(jié)腸組織EGF

9、的表達(dá)：MG組與BG組相比，兩組結(jié)腸EGF表達(dá)無(wú)顯著性差異(P>0.05)；SG組與MG組相比，血清EGF含量升高，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有顯著性差異(P<0.05)。柳氮磺胺吡啶組與泄?jié)峤舛痉叫┝拷M相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；泄?jié)峤舛痉酱髣┝拷M與柳氮磺胺吡啶組相比，血清EGF含量升高，差異有顯著性差異(P<0.05)。⑶用硝酸還原酶法及化學(xué)法檢測(cè)UC大鼠血清NO含量及NOS活性：MG組與BG組相比，其血清NO含量及NOS活性升高，

10、(P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義：SG組與MG組相比，血清NO含量及NOS活性降低，差異有顯著性差異(P<0.05)。SG組與LG組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；HG組與SG組相比，血清NO含量及NOS活性降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；(P<0.05)；HG組與LG組相比，血清NO含量及NOS活性降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。用硝酸還原酶法及化學(xué)法檢測(cè)UC大鼠結(jié)腸組織NO含量及NOS活性：BG組大鼠結(jié)腸組織NO含量及NO

11、S活性處于較低水平，MG組大鼠結(jié)腸組織NO含量及NOS活性顯著上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；SG組、LG組及HG組大鼠結(jié)腸組織NO含量及NOS活性較MG組相比，均降低，其中，HG組與MG組相比，大鼠結(jié)腸組織NO含量及NOS活性明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；LG組、SG組大鼠結(jié)腸組織NO含量及NOS活性與MG組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：泄?jié)峤舛痉侥芨纳茲冃越Y(jié)腸炎大鼠的一般狀況，降低