蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠核因子-κB抑制蛋白的影響.pdf

1、目的：潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative Colitis, UC)是難治性消化系統(tǒng)疾病之一，中醫(yī)藥治療本病有豐富的經(jīng)驗(yàn)。蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方是導(dǎo)師應(yīng)用于臨床的經(jīng)驗(yàn)方。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立UC大鼠模型，觀察蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方對(duì)UC大鼠結(jié)腸組織中核因子-κ B(nuclear factor-kappaB，NF-κB)及其抑制蛋白(inhibitor ofκB,IκB)表達(dá)的影響，探討該方治療UC的可能作用機(jī)制。
　　 方法：將60只健康清潔

2、級(jí)Wistar大鼠，隨機(jī)分成5組：正常組(N組)、模型組（M組）、柳氮磺胺吡啶組（SASP組）、蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方高劑量組(HD組)、蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方低劑量組（LD組），每組12只。除正常組外，其余四組大鼠采用三硝基苯磺酸（2，4，6-trinitrobenzenesulfonicacid,TNBs）/乙醇聯(lián)合造模法誘導(dǎo)UC動(dòng)物模型。造模后第3天，正常組及模型組用生理鹽水灌胃，各治療組予以藥液灌胃，連續(xù)治療14天，觀察大鼠活動(dòng)、體重、

3、大便性狀等一般情況變化；計(jì)算各組潰瘍的個(gè)數(shù)，評(píng)價(jià)大鼠結(jié)腸組織炎癥、充血水腫程度；采用免疫組化法檢測(cè)大鼠結(jié)腸粘膜IκB-α、NF-κB的表達(dá)水平。根據(jù)觀察結(jié)果進(jìn)行有效性評(píng)價(jià)，分析蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方對(duì)IκB-α及NF-κB的影響。
　　 結(jié)果：
　　 1.一般情況
　　 與正常組比較，造模大鼠第2天開始精神不振，活動(dòng)減少，拱背，被毛松散，毛色偏黃無(wú)光澤，食量下降，拉稀便或黏液血便，形趨消瘦。用藥治療1周后，HD組和S

4、ASP組大鼠稀便或軟便漸停，飲食、活動(dòng)不斷增多，毛發(fā)漸復(fù)光澤；LD組大鼠有一定的改善，但沒(méi)有HD組改善明顯。
　　 2.結(jié)腸組織大體觀察
　　 與M組比較，SASP組、HD組潰瘍個(gè)數(shù)減少明顯。M組潰瘍個(gè)數(shù)為（2.82±0.98），SASP組、HD組、LD組的潰瘍個(gè)數(shù)分別為（1.82±0.98）、(1.17±0.94)、(2.0肚1.04)。SASP組、HD組分別與M組相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；HD組與S

5、ASP組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)；LD組與M組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05）。
　　 M組織損傷積分為(3.73±0.90)，SASP組、HD組、LD組織損傷積分分別為(2.64±0.92)、(2.58±1.24)、(3.25±1.42)，SASP組、HD組分別與M組相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；HD組與SASP組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)；LD組與M組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞

6、0.05)。3.光鏡觀察
　　 HD組大鼠結(jié)腸粘膜的炎癥程度與M組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；SASP組大鼠結(jié)腸粘膜的炎癥程度與M組比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)；HD組與SASP組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；SASP組與LD組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05）。
　　 M組大鼠粘膜層缺失，粘膜下層可見充血水腫和炎細(xì)胞浸潤(rùn)，HD組腸粘膜水腫和充血程度，均明顯輕于M組大鼠(P＜0.05)；

7、而SASP組只在改善充血程度方面有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。4.IκB-α及NF-κBp65檢測(cè)結(jié)果
　　 M組結(jié)腸組織IκB-α蛋白陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率為(20.05±1.77)％，高于N組(10.33±1.36)％(P＜0.05)；HD組、SASP組與LD組結(jié)腸組織蛋白陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率分別為(11.41±1.46)％、(13.13±1.67)％，(13.28±1.55)％，均低于M組(P＜0.05)。HD組與SASP組相比，差異有

8、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；HD組與LD組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；SASP組與LD組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)，HD組與N組比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05），SASP組、LD組分別與N組比較，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　 M組結(jié)腸組織NF-κBp65蛋白陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率為(19.42±1.24)％，高于N組(8.70±1.11％)(P＜0.05)；HD組、SASP組與LD組結(jié)腸組織蛋白陽(yáng)性

9、細(xì)胞表達(dá)率分別為(9.12±1.36)％、(10.35±0.95)％、(10.50±1.02)％，均低于M組(P＜0.05)。HD組與SASP組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；HD組與LD組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；SASP組與LD組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05），HD組與N組比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)，SASP組、LD組分別與N組比較，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　 結(jié)論：

10、>　　 1蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方能改善UC大鼠一般情況，減少模型大鼠結(jié)腸粘膜潰瘍個(gè)數(shù)，改善結(jié)腸粘膜充血、水腫等病理變化。中藥高劑量與柳氮磺胺吡啶相比，在減少潰瘍個(gè)數(shù)、改善損傷積分方面有同等療效；而在改善炎癥程度和降低IκB-α、NF-κB表達(dá)水平方面，中藥高劑量作用優(yōu)于柳氮磺胺吡啶。
　　 2蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方能夠下調(diào)IκB-α及NF-κB表達(dá)水平，促使兩者結(jié)合，從而降低NF-κB的活性，限制細(xì)胞因子的釋放，以減少腸道的炎癥和免疫