流動注射與毛細管電泳-化學發(fā)光檢測聯用系統及微型化的研究.pdf

1、東北大學博士學位論文流動注射與毛細管電泳-化學發(fā)光檢測聯用系統及微型化的研究姓名：黃曉晶申請學位級別：博士專業(yè)：檢測技術與自動化裝置指導教師：方肇倫2001.11.1查j ! 查堂墮主堂垡堡塞 一一——! ! 星一劑濃度穩(wěn)定，而且易集成到微流控C E 系統中。在第三章里，成功地實現了由原位產生R u ( b p y ) 3 s + 的柱后E C L 反應檢測由5 0I ．t m 內徑毛細管分離的樣品，證明了用于將E C L 反應從c E

2、 高壓電場分離的在柱電接頭是不必要的。用于收集E C L 光的光纖直徑( 1m m ) 顯著大于毛細管內徑( 5 0 “m ) ，使E C L光的收集更為有效。毛細管出口、工作電極和光纖的相對位置會影響樣品與電生試劑之間的混合和光的收集效率，影響到系統的靈敏度和分離效率，因而對三者之間的相對位置進行了優(yōu)化。以氨基酸為模型化合物考察微型化的F I ．C E —E C L 系統的性能。三種氨基酸在1 ．0 k V 下1 8 0 S 內基線分

3、離。脯氨酸，纈氨酸和苯丙氨酸的檢出限( 3 a ) 分別為1 ．2 ，5 0 ，2 5l a m o l ／1 ，板高為1 4 ，2 8 ，2 1p a n ，峰高的精度分別為1 ．4 ％，5 ．4 ％和4 ．3 ％R S D( n = 9 ) 。通過短管的快速分離與不間斷電壓c E 自動連續(xù)進材目結合，微型化的F I —c E —E C L 系統可以達到每小時5 0 樣的高分析速度。．} ／一D為了滿足分析儀器小型化和集成化的需要，在

4、第四章中設計并以微加工技術制作了c E ．E C L 微流控玻璃芯片，首次實現在c E 芯片上的柱端E C L 檢測。f 分析過程中采樣、分離以及樣品和試劑的混合在一塊5 8 ×1 6 ×3 ．4m m 的微芯片上進行。利用第三章的研究結果，沒有使用在柱電接頭，對C E 分離的樣品直接進行E C L 測定。E C L 試劑池集成在芯片上，電滲流為驅動力推動試劑在通道中流動的方法，可達到靈活穩(wěn)定的目的。E C L 試劑

5、R u ( b p y ) 3 2 + 在通道中流動時可能會由于吸附到通道壁上而改變電滲流。為防止進樣過程中R u ( b p y ) s 2 + 流入分離通道，在芯片上又增加了一條緩沖液通道來實現夾切進樣。通過對氨基酸的分離考察C E ．E C L 微流控芯片的分析性能。對柱端緩沖液流速和通道內E C L 試劑流速對芯片分析性能的影響進行了研究。三種氨基酸在1 8 0 S內基線分離。脯氨酸、纈氨酸和苯丙氨酸的檢出限分別為2 0 、6

6、0 和6 0f m o l ，峰高的精度分別為4 ．1 ％、3 ．5 ％和2 ．3 ％，R S D ( n - 7 ) 。能夠實現取樣、分離、樣品／試劑混合的C E —E C L 微流控芯片，具有分析速度快，樣品和試劑消耗小，占用空間小和易發(fā)展成為便攜式儀器等許多優(yōu)點。與平板芯片上的H ．型通道相比，C E —E C L 芯片具有相似的質量靈敏度，但由于樣品體積小等原因，濃度靈敏度相對較低。今后的工作將集中在通過在線樣品富集等技術提高C