常規(guī)及微型化毛細(xì)管電泳-電化學(xué)檢測(cè)聯(lián)用技術(shù)及其應(yīng)用研究.pdf

1、本文分為七章： 第一章緒論 毛細(xì)管電泳具有分離效率高，快速和所需樣品量少等特點(diǎn)。應(yīng)用范圍包括無(wú)機(jī)離子的分析，有機(jī)小分子分析，環(huán)境分析，食品分析，生物分析，藥物分析等。在分析化學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)、藥物化學(xué)、食品化學(xué)、環(huán)境化學(xué)和醫(yī)學(xué)等許多領(lǐng)域，有著廣闊的應(yīng)用前景。在緒論中回顧了毛細(xì)管電泳的歷史，現(xiàn)狀，發(fā)展趨勢(shì)，主要特點(diǎn)和研究進(jìn)展，重點(diǎn)對(duì)毛細(xì)管電泳．電化學(xué)檢測(cè)(CE-ED)進(jìn)行了較為全面的綜述。根據(jù)本論文的研究?jī)?nèi)容，重點(diǎn)

2、綜述了常規(guī)及微型化毛細(xì)管電泳在中藥，食品成分分析和臨床疾病診斷中的應(yīng)用研究。本論文采用CE-ED技術(shù)，測(cè)定了幾種中藥、食品中的活性成分，同時(shí)也將微型化毛細(xì)管電泳應(yīng)用范圍延伸到臨床疾病的診斷上，大大拓展了CE-ED的應(yīng)用范圍，探討了毛細(xì)管電泳．電化學(xué)檢測(cè)聯(lián)用技術(shù)在藥物分析、生化分析中的一些應(yīng)用。 第二章 杜仲及其保健品中生物活性成分的毛細(xì)管電泳 電化學(xué)檢測(cè)本實(shí)驗(yàn)采用毛細(xì)管電泳．電化學(xué)檢測(cè)法(CE-ED)同時(shí)分離測(cè)定了杜仲葉

3、、杜仲皮及市售杜仲保健品中蘆丁、抗壞血酸、金絲桃甙、綠原酸、槲皮素等多種生物活性成分的含量，考察了運(yùn)行緩沖液酸度和濃度、分離電壓、氧化電位和進(jìn)樣時(shí)間等實(shí)驗(yàn)參數(shù)對(duì)分離、檢測(cè)的影響。在最優(yōu)化條件下，以300μm碳圓盤電極為檢測(cè)電極，檢測(cè)電位為+0.95 V(vs．SCE)，50 mmol/L硼砂的運(yùn)行緩沖液(pH 9.0)中，上述各組分在20 min內(nèi)可實(shí)現(xiàn)基線分離。各組分濃度與峰電流在三個(gè)數(shù)量級(jí)范圍內(nèi)呈良好線性，檢測(cè)下限(S/N=3)分別

4、為3.27×10<'-8>g/mL、8.10×10<'-8>g/mL、4.50×10<'-8>g/mL、9.57×10<'-8>g/mL和4.03×10<'-8>g/mL。該方法已成功地應(yīng)用于杜仲及其保健品中生物活性成分的測(cè)定，結(jié)果令人滿意。 第三章地骨皮中生物活性成分的毛細(xì)管區(qū)帶電泳 安培檢測(cè)方法研究采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳．安培檢測(cè)法同時(shí)分離測(cè)定了中藥地骨皮中刺槐素、莨菪亭、山奈酚、對(duì)香豆酸、香草酸、木犀草素和槲皮素等多種

5、生物活性成分，考察了運(yùn)行液酸度和濃度、分離電壓、氧化電位和進(jìn)樣時(shí)間等實(shí)驗(yàn)參數(shù)對(duì)分離、檢測(cè)體系的影響。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，以直徑300 μm的碳圓盤電極為工作電極，檢測(cè)電位為+0.95V(Vs.SCE)，在80 mmol/L的硼砂緩沖溶液(pH 9.0)中，七組分在24 min可實(shí)現(xiàn)基線分離。七組分峰電流與其濃度在1.0×10<'-3>～1.0×10<'-1>g/L范圍內(nèi)呈良好線性，檢出限(S/N=3)達(dá)3.5×10<'5>～6.0×10<

6、'-5>g/L。該方法成功地應(yīng)用于中藥地骨皮中生物活性成分的含量檢測(cè)。 第四章 毛細(xì)管區(qū)帶電泳-安培檢測(cè)蒲公英中的多酚 采用毛細(xì)管電泳-安培檢測(cè)法(CE-AD)同時(shí)測(cè)定了蒲公英中的香葉木素、阿魏酸、綠原酸、木犀草素和咖啡酸五種主要生物活性成分的含量。本實(shí)驗(yàn)采用柱端射壁式檢測(cè)法，以直徑300 μm的碳圓盤電極為工作電極，檢測(cè)電位為+0.85 V(Vs.SCE)。在優(yōu)化的測(cè)定條件下，上述五種組分在50mmol/L，pH 8.

7、0的硼砂緩沖溶液中17 min內(nèi)達(dá)到基線分離。五種組分在兩個(gè)數(shù)量級(jí)的范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，檢測(cè)下限(S/N=3)達(dá)1.7×10<'-7>-7.0×10<'-7>g/mL。該法已成功的應(yīng)用于蒲公英中的多酚的分離檢測(cè)；結(jié)果令人滿意。 第五章毛細(xì)管電泳-電化學(xué)方法檢測(cè)玉米須、玉米葉及玉米粒中生物活性成分 玉米含有豐富的黃酮類和酚酸類成分。然而，除玉米粒外，玉米的其他部位沒有受到重視。本實(shí)驗(yàn)采用毛細(xì)管電泳．電化學(xué)方法分離檢測(cè)玉米

8、須、玉米葉及玉米粒中的表兒茶酸、蘆丁、維生素C(Vc)、山萘酚、綠原酸和槲皮素，并分析比較了玉米須、玉米葉及玉米粒中主要活性成分含量。為了獲得最優(yōu)化的分析條件，研究了緩沖液的濃度、酸性；分離電壓；工作電極電位等實(shí)驗(yàn)條件。在最優(yōu)化條件下，上述六種被分析物能夠在40mmol/L(pH 9.2)硼砂硼酸體系中，在19 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)較好分離。檢測(cè)下限在4.97×10<'-8>到9.75×10<'-8>g/mL之間．該方法已經(jīng)成功地用于玉米須、玉

9、米葉及玉米粒中生物活性成分檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果令人滿意。 第六章毛細(xì)管電泳-安培檢測(cè)法在咖啡天然抗氧化成分極性溶劑提取效率中的研究 本實(shí)驗(yàn)首次采用毛細(xì)管電泳．安培檢測(cè)法(CE-AD)同時(shí)分離測(cè)定了咖啡中兒茶素、蘆丁、阿魏酸、鄰苯二酚、綠原酸、咖啡酸、沒食子酸和原兒茶酸等八種抗氧化活性成分，考察了運(yùn)行液酸度和濃度、分離電壓、氧化電位和進(jìn)樣時(shí)間等實(shí)驗(yàn)參數(shù)對(duì)分離、檢測(cè)體系的影響。在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件下，以直徑300μm碳圓盤電極作為工作電

10、極，檢測(cè)電位為+950 mV(vs.SCE)，在80 mmol/L的硼砂緩沖溶液(pH 8.4)中，八組分在26 min可實(shí)現(xiàn)基線分離。八組分濃度與峰電流在三個(gè)數(shù)量級(jí)范圍內(nèi)呈良好線性，檢出限(S/N=3)達(dá)6.0x10<'-8>-3.6×10<'-7>g/mL。該方法已成功地應(yīng)用于不同極性溶劑對(duì)咖啡中抗氧化成分提取效率的研究，結(jié)果令人滿意。 第七章微型化毛細(xì)管電泳-安培檢測(cè)法測(cè)定人體唾液和尿液中的尿酸成分 本實(shí)驗(yàn)采用改良