重組人促紅細(xì)胞生成素對腦出血后神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、背景：隨著人口老齡化程度的加速，腦血管病，尤其是腦出血，成為常見的危害人類身體健康的嚴(yán)重疾病[1]。該病具有發(fā)病急、進(jìn)展快、致殘率高、致死率高、并發(fā)癥多等特點[2,3]，截止目前為止，該病治療方法較為局限，后期并發(fā)癥發(fā)生率依然較高[4]。但通過科研人員在對腦出血發(fā)病機(jī)制的研究中也取得了一定的進(jìn)展。促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin，EPO)是由肝臟和腎臟分泌的一種激素樣物質(zhì)，用于調(diào)節(jié)血細(xì)胞生成的一類細(xì)胞因子[5]。重組人促紅細(xì)

2、胞生成素（rhEPO）已規(guī)范生產(chǎn)。EPO的神經(jīng)保護(hù)作用使其成為一個研究熱點，其神經(jīng)保護(hù)作用開始被廣泛研究[6,7]。EPO治療腦血管病的重要機(jī)制之一是保護(hù)神經(jīng)元，改善神經(jīng)元損傷。實驗研究報道，EPO能夠提高腦缺血患者的神經(jīng)功能[8]，但是EPO在腦出血中的研究較少，而且其具體作用機(jī)制不是很清楚，本課題探討重組人促紅細(xì)胞生成素rhEPO是否具有腦出血后神經(jīng)系統(tǒng)保護(hù)作用及其相應(yīng)機(jī)制。
　　方法：將8周齡的Wistar雄性大鼠30只隨機(jī)

3、分3組（每組10只），組別為假手術(shù)組、腦出血ICH組、rhEPO治療組，腦出血組大鼠進(jìn)行ICH造模，假手術(shù)組除不注血外，其余步驟同ICH組，rhEPO組術(shù)后5分鐘給予腹腔注射rhEPO，所有動物24小時后進(jìn)行神經(jīng)功能學(xué)評分，收集大鼠腦組織，利用原位缺口末端標(biāo)記法檢測神經(jīng)細(xì)胞凋亡的變化；采用免疫組織化學(xué)SP法檢測凋亡蛋白Caspase3表達(dá)；并采用Real-time PCR和Western blot檢測磷酸化JAK2、磷酸化STAT5基因

4、和蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果：手術(shù)建立腦出血模型后24小時進(jìn)行神經(jīng)功能評分。按 Longa5分制標(biāo)準(zhǔn)判定，ICH組4只評價為1分，3只評價為2分，2只評價為3分；rhEPO組治療后，5只評價為1分，2只評價為2分，1只評價為3分。說明rhEPO可以改善大鼠腦出血后神經(jīng)元損傷，恢復(fù)神經(jīng)功能。與假手術(shù)組相比，ICH模型組和rhEPO治療組中神經(jīng)元凋亡細(xì)胞及Caspase3的蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)明顯增多(P＜0.05)，而rhEPO組中凋亡

5、細(xì)胞與ICH模型組相比明顯減少(P＜0.05)；與假手術(shù)組相比，ICH模型組和rhEPO組中JAK2和STAT5的蛋白表達(dá)和mRNA表達(dá)顯著上升(P＜0.05)，與ICH模型組相比，rhEPO組中JAK2和STAT5的蛋白表達(dá)和mRNA表達(dá)顯著降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論：外源性rhEPO可以對腦出血后神經(jīng)細(xì)胞起到保護(hù)作用，其作用機(jī)制是通過調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)蛋白caspase以及JAK2/STAT5信號改善大鼠腦