重組人促紅細胞生成素對大鼠急性創(chuàng)傷性腦損傷的神經保護作用及機制.pdf

1、目的：觀察大鼠急性創(chuàng)傷性腦損傷（Traumaticbraininjury，TBI）后重組人促紅細胞生成素(rhEPO)對創(chuàng)傷腦組織中基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)和水通道蛋白-4(AQP-4)表達的影響，探討其神經保護作用機制。
　　 方法：健康雄性SD大鼠55只，體重250-350g，隨機分為假手術組(n=5)、對照組(n=25)和Epo治療組(n=25)；對照組和治療組采用改進的Feeney等人的方法制作腦創(chuàng)傷模型，假手術

2、組僅切開頭皮，開骨窗，不造成腦損傷。rhEPO治療組在模型建立后立即腹腔注射rhEPO5000U/kg，對照組和假手術組在等時間點給予等量生理鹽水。根據傷后處死時間點不同每組再分為5個亞組，即6h、24h、48h、3d、7d組，每個亞組5只動物。
　　 模型制作成功后，先行神經功能評分，分別于術后6h、24h、48h、3d、7d，用10％水合氯醛過度麻醉，斷頭、取腦，行HE染色和免疫組織化學方法檢測大腦皮層損傷處組織中基質金屬蛋

3、白酶-9(MMP-9)及水通道蛋白-4(AQP-4)的表達。
　　 結果：
　　 1.神經行為評定：大鼠在顱腦損傷后立即出現(xiàn)前肢抱握屈曲、后肢強直、肌張力增高、不能直走、向一側打轉等表現(xiàn)。清醒后精神萎靡不振，活動減少。術后神經功能評分均在7～12分之間。
　　 2.組織學觀察：傷后6h可見神經元細胞腫脹。48h神經細胞周圍可見空隙，核固縮。暗細胞出現(xiàn)增多，72h神經膠質細胞和組織間隙水腫明顯，傷后7d水腫基本減退

4、，膠質細胞仍增生明顯。假手術組無明顯變化。
　　 3.免疫組織化學：腦創(chuàng)傷大鼠6h(51.82±4.62)創(chuàng)傷灶腦組織出現(xiàn)MMP-9的表達，隨著損傷時間的延長其表達明顯增強48h(83.51±9.61)達最高，與假手術組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。AQP-4的表達在6h(42.18±12.78)出現(xiàn)增高，24h(55.28±9.88)達最高，與假手術組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。Epo治療組和對照組相比較