靈芝三萜化合物的抗炎作用及分子機制初探.pdf

1、炎癥是機體對有害刺激所發(fā)生的復雜的防御反應，但過度的炎癥反應會對機體造成損傷，與多種疾病相關。目前臨床上常用的抗炎藥主要有非甾體抗炎藥和甾體類抗炎藥。雖然這兩類抗炎藥都有一定的臨床抗炎效果，但長期大量使用也會產生，如胃粘膜、肝臟、腎臟損害等一系列不良反應。天然藥物具有來源廣、造價低、副作用小等特點，隨著對天然藥物研究的不斷深入，部分天然藥物的抗炎作用已經得到認可。尋找低毒高效的新型天然抗炎藥物是當前的研究熱點之一。靈芝是著名的高等藥用真

2、菌，早在兩千多年前靈芝就被我國人民所熟悉并采集使用。研究表明，靈芝三萜是靈芝中主要活性成分之一。近年來有不少文獻報道，靈芝三萜類化合物具有很強的藥理活性，如具有保肝抗腫瘤、抑制組胺釋放等作用。但對靈芝三萜類化合物的抗炎作用及其機理卻鮮有報道。本研究首先用LPS刺激小鼠巨噬細胞系Ana-1建立細胞炎癥模型，通過MTS法檢測鹿角靈芝、赤芝、紫芝3種甲醇總提取物對細胞增殖的影響，并檢測代表性炎性介質的分泌量。對以上3種甲醇總提取物中提取的9種

3、三萜類化合物的體外抗炎效果進行檢測，篩選出4種高抗炎化合物。以4種高抗炎化合物為代表，通過Real-time PCR檢測TLR4、Myd88基因的表達以及通過Westernblotting檢測NF-κB通路的關鍵蛋白表達水平，對其抗炎作用的潛在分子機制進行初步探究。以高抗炎化合物ganodermanontriol為代表，觀察其對LPS/D-galN誘發(fā)小鼠急性肝炎模型的體內抗炎作用的研究。通過分析小鼠肝臟病理切片，檢測相關指標的分泌量，

4、驗證ganodermanontriol對LPS/D-galN誘發(fā)小鼠肝炎的保護作用。
　　結果如下:1、鹿角靈芝、赤芝、紫芝3種甲醇總提取物在100μg/mL對細胞增殖有一定的抑制作用，但在25μg/mL、50μg/mL的劑量下對細胞沒有抑制作用。3種靈芝的甲醇總提取物在25μg/mL、50μg/mL濃度下對巨噬細胞NO、PGE2、TNF-α、IL-6、IL-1β釋放量與LPS組相比較均顯著降低。2、α-lignocericaci

5、d、20-OH LucidericA、20-OH LucidericN、ganodermanontriol、Ganoderiol A、Ganoderiol D、Ganoderiol F、Ergosterol peroxide、Ergosterol在5μg/mL、10μg/mL、25μg/mL對細胞增殖均沒有明顯影響且NO、PGE2、TNF-α、IL-6、IL-1β分泌量與LPS組相比較不同程度的降低，表明這9種化合物均有一定的抗炎作用。

6、其中20-OH lucidericN、ganodermanontriol、Ganoderiol A、Ergosterol peroxide四種化合物抗炎作用更加顯著。3、4種代表化合物均能抑制Myd88基因表達，且抑制LPS誘發(fā)的NF-κB的激活，特別表現(xiàn)在抑制IκB-α降解以及抑制IκB-α和p65磷酸化。4、LPS/D-galN誘發(fā)小鼠急性肝炎模型，ganodermanontriol給藥組小鼠肝臟組織病變較輕，且肝臟組織中AST、A