化合物N-2和BDM的抗炎活性及其作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的：本研究采用前期實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的兩個(gè)活性較好的化合物 N-2（9-(4-氟-苯基)-5,8,9,10-四氫-4H-氧雜-2,3,9,11b-四氮雜-環(huán)戊二烯并[a]蒽）和BDM（9-丁基-9,10-二氫苯并吡喃[8,7-e][1,3]噁嗪-2（8H）-酮）為研究目標(biāo)，探究其抗炎活性和作用機(jī)制。方法：1.體外實(shí)驗(yàn)采用脂多糖（LPS）誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7產(chǎn)生炎癥，通過ELISA法檢測化合物N-2和BDM對TNF-α和IL-6表達(dá)

2、的影響；應(yīng)用Western blot法測定化合物N-2和BDM對ERK1/2、JNK、p38 MAPK、NF-κB p65和IκBα蛋白及其磷酸化水平的表達(dá)；2.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)采取LPS經(jīng)小鼠鼻入肺引發(fā)急性肺損傷，用ELISA檢測小鼠肺泡灌洗液中TNF-α和IL-6的含量，并且通過Western blot法檢測ERK1/2、JNK、p38 MAPK、NF-κB p65和IκBα蛋白及其磷酸化水平的表達(dá)，同時(shí)還檢測了小鼠肺組織中髓過氧化物酶含量

3、及肺濕/干重比（W/D），觀察了肺組織病理變化。
　　結(jié)果：1.體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在LPS作用RAW264.7細(xì)胞24h后，培養(yǎng)上清中TNF-α和IL-6的表達(dá)量明顯增高?；衔颪-2和BDM顯著地降低了TNF-α和IL-6的表達(dá)水平。Western blot結(jié)果顯示，不同濃度的化合物N-2也降低了LPS活化的ERK1/2、p38 MAPK、NF-κB p65的磷酸化和IκBα的降解。不同濃度的化合物BDM對LPS活化的RAW26

4、4.7細(xì)胞的MAPKs信號通路蛋白有顯著地抑制作用，而對NF-κB信號通路蛋白并無太大的影響；2.體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果表明，化合物N-2明顯抑制了小鼠肺泡灌洗液中TNF-α和IL-6的表達(dá)。另外，通過測定小鼠肺組織內(nèi)髓過氧化物酶、干濕重比以及觀察小鼠肺部病理組織變化等指標(biāo)，綜合地說明了化合物N-2對于小鼠急性肺損傷導(dǎo)致的病變有顯著地緩解，Western blot結(jié)果顯示，不同濃度的化合物N-2也降低了LPS活化的ERK1/2、p38 MAPK的