基于BDNF-TrkB信號(hào)通路研究痛瀉要方中白芍防風(fēng)緩解IBS-D內(nèi)臟高敏的作用機(jī)制.pdf

1、目的：
　　選用SD大鼠乳鼠為實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象，復(fù)制IBS-D動(dòng)物模型，以與腸易激綜合征（IBS）內(nèi)臟高敏密切相關(guān)的BDNF-TrKB信號(hào)通路作為切入點(diǎn)，研究痛瀉要方及其拆方緩解IBS內(nèi)臟高敏與BDNF-TrKB信號(hào)通路之間的關(guān)系，深入探討痛瀉要方及拆方緩解腸易激綜合征（IBS）內(nèi)臟高敏的作用原理。
　　方法：
　　模型組SD大鼠出生后8-21天接受PTCA球囊進(jìn)行結(jié)直腸擴(kuò)張（壓力60mmHg），給予充足的水及食物。在隨機(jī)

2、抽取20只大鼠作為正常組大鼠（雌雄各半），其余大鼠均為模型大鼠。
　　飼養(yǎng)至第8周，通過(guò)結(jié)直腸擴(kuò)張檢測(cè)觀察大鼠腹部回縮反應(yīng)（abdominal wi thdrawal reflex，AWR）。將除正常組大鼠外的所有大鼠隨機(jī)分為4組：模型組、全方組、白芍防風(fēng)組、陳皮白術(shù)組，次日予以藥物灌喂治療。
　　在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中觀察每組大鼠一般情況及大便情況。于造模前后、治療前后稱重每只大鼠體重。于造模后和治療結(jié)束后檢測(cè)每組大鼠大便含水量和記

3、錄Bristo l大便分類評(píng)分。于治療前后檢測(cè)每只大鼠腹部回縮反應(yīng)（AWR）。于結(jié)束治療后次日采血，摘取距肛門5-8cm結(jié)腸組織及海馬組織。
　　每組分別采用10只大鼠海馬組織和結(jié)腸組織進(jìn)行基因芯片實(shí)驗(yàn)；從芯片原始數(shù)據(jù)中提取BDNF信號(hào)系統(tǒng)包含的所有基因（BDNF、TrkB等）的表達(dá)值。
　　結(jié)果：
　?、俅笫笠话闱闆r觀察：正常組大鼠：一般情況佳。模型組大鼠：大鼠造模3天后逐漸出現(xiàn)一般情況減退，大便顆粒數(shù)增多，可見(jiàn)稀便

4、及肛周毛發(fā)被稀便污染。全方組和白芍防風(fēng)組大鼠：大鼠自藥物灌胃3-5天起逐漸一般情況好轉(zhuǎn)，灌胃10-14天后大便腹瀉情況基本緩解，體重增長(zhǎng)速度逐漸回升。陳皮白術(shù)組大鼠：大鼠自藥物灌胃10天后逐漸出現(xiàn)一般情況緩解，但至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，少部分大鼠仍有大便偏稀的情況。
　?、诖笫篌w重增長(zhǎng)量：與正常組相比，模型組大鼠體重增長(zhǎng)量明顯較正常組少（P＜0.05）。治療結(jié)束后，全方組與白芍防風(fēng)組大鼠體重增長(zhǎng)量較模型組增高，（P＜0.05）；陳皮白術(shù)組大

5、鼠體重增長(zhǎng)量較模型組不明顯（P＞0.05）。
　?、鄞笫蟠蟊闱闆r：造模后，模型組大鼠大便含水量及大便Bristol分級(jí)評(píng)分較正常組明顯升高（P＜0.05）；治療后，全方組大鼠和白芍防風(fēng)組大鼠與同期模型組大鼠比較，大便含水量及大便Bristol分級(jí)評(píng)分明顯降低，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；全方組大鼠和白芍防風(fēng)組大鼠治療前后自身對(duì)照大便含水量及大便Bristol分級(jí)降低（P＜0.05）；而模型組大鼠和陳皮白術(shù)組大鼠同期比較和自

6、身組內(nèi)前后對(duì)照比較大便含水量及大便Bristol分級(jí)評(píng)分情況改變不明顯（P＞0.05）。
　?、艽笫髢?nèi)臟疼痛閾值：與正常組比較，模型組大鼠內(nèi)臟疼痛閾值降低（P＜0.05）；同期大鼠雌雄內(nèi)臟疼痛閾值比較，雌性大鼠內(nèi)臟疼痛閾值明顯低于雄性大鼠內(nèi)臟疼痛閾值（P＜0.05）；治療結(jié)束后，全方組和白芍防風(fēng)組大鼠內(nèi)臟疼痛閾值較治療前升高（P＜0.05）；模型組和陳皮白術(shù)組治療前后內(nèi)臟疼痛閾值改變不明顯（P＞0.05）。
　?、荽笫髽?biāo)本病

7、理學(xué)檢測(cè)：各組大鼠結(jié)腸上皮組織和海馬組織均無(wú)明顯炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和間質(zhì)水腫，符合IBS病理學(xué)改變。
　?、薮笫驜DNF-TrkB基因表達(dá)：在結(jié)腸組織中，模型組大鼠BDNFmRNA和TrkBmRNA表達(dá)值明顯高于正常組（P＜0.05）；與模型組比較，全方組和白芍防風(fēng)組大鼠結(jié)腸組織中BDNFmRNA和TrkBmRNA表達(dá)值較模型組大鼠的表達(dá)值降低（P＜0.05）；在海馬組織中，模型組大鼠海馬組織中BDNFmRNA表達(dá)值較正常組大鼠表達(dá)量降

8、低（P＜0.05），而模型組海馬組織中TrkBmRNA表達(dá)值較正常組升高（P＜0.05）；全方組、白芍防風(fēng)組、陳皮白術(shù)組大鼠海馬組織中TrkBmRNA表達(dá)值同模型組相比差異不明顯，但存在明顯下降趨勢(shì)。
　　結(jié)論：
　?、偻礊a要方可改善模型組大鼠IBS-D的病理狀態(tài)。
　?、谕礊a要方中“抑木”組分-白芍防風(fēng)是治療IBS-D的有效組分。
　?、跙DNF-TrkB信號(hào)通路可能是腸易激綜合征內(nèi)臟高敏形成的機(jī)制之一。