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文檔簡介
1、目的:
1、探討腸易激綜合征(irritable bowel syndrome IBS)內(nèi)臟高敏性動物模型的建模方法,以及成模后模型穩(wěn)定性的觀察,為進一步實驗的造模方法提供依據(jù)。
2、建立大鼠內(nèi)臟高敏感性模型,檢測各組大鼠海馬組織以及腸管組織的基因表達情況,以探討可能介導IBS-D內(nèi)臟高敏性的通路機制。
3、從基因的表達差異上研究痛瀉要方緩解IBS-D內(nèi)臟高敏性的機制
方法:
1、用大小
2、不等的血管成形術球囊對幼鼠與成年大鼠結(jié)直腸擴張,在停止刺激后
2周、4周、6周檢測大鼠痛閾值,判斷造模模型是否成功并且評價兩種造模方法的穩(wěn)定性
2、以出生第8天的SD大鼠為實驗對象,實驗組在出生后8-21天每天接受血管成形術球囊擴張,對照組大鼠被溫柔抓起,腹摸其會陰部1分鐘,大鼠在完成上述刺激后,不再給與任何刺激,飼養(yǎng)至第5周,評價大鼠的內(nèi)臟敏感性,繼續(xù)喂養(yǎng)并做好標記,痛瀉要方組持續(xù)灌胃中藥4周,此后再次檢測大鼠的內(nèi)
3、臟敏感性,劇結(jié)果判斷痛瀉要方是否有效,停藥后繼續(xù)普通喂養(yǎng)1周后取大鼠血清、海馬、腸管組織樣本,利用基因芯片技術分析各組腦腸中的基因表達情況,利用免疫組化技術檢測蛋白的表達情況。
結(jié)果與結(jié)論:
1、用幼鼠分別在出生后8-21天每天接受均使用血管成形術球囊擴張(壓力60mmHg)所造的模型與用成年大鼠同樣方法所造的模型對比,前者所建立的動物模型更穩(wěn)定,在一定程度上說明以新生鼠為實驗對象所建立的動物模型更符合腸易激綜合征慢
4、性疾病的特征。
2、模型組海馬組織的c-fos基因的表達量明顯高于空白對照組海馬組織c-fo基因的表達量(p<0.05),痛瀉要方組海馬組織的c-fo基因的表達量明顯低于模型組海馬組織c-fos基因的表達量(p<0.05)。
3、模型組腸管組織組織IL1r1基因表達量明顯高于空白對照組腸管組織組織IL1r1基因表達量(p<0.05),模型組腸管組織組織IL1r1基因表達量明顯低于痛瀉要方組腸管組織組織IL1r1基因表
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