皂苷與斑玉蕈抗氧化酶活性相關(guān)性及其轉(zhuǎn)錄水平上的初步分析.pdf

1、斑玉蕈(Hypsizygus marmoreus)是工廠(chǎng)化栽培的主要食用菌之一。工廠(chǎng)化栽培的斑玉革在從營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)階段向生殖生長(zhǎng)階段轉(zhuǎn)化需要經(jīng)過(guò)45 d左右的后熟期，因此，較其他工廠(chǎng)化食用菌品種的生產(chǎn)效率低。研究表明添加外源皂苷后可以縮短菌絲后熟期，誘發(fā)原基的產(chǎn)生。本文擬進(jìn)一步研究外源皂苷對(duì)斑玉蕈皂苷合成及抗氧化酶活性的影響，并從分子水平加以分析。
　　本研究以斑玉蕈正常菌株SIEF3257和退化菌株SIEF3246為供試菌株，測(cè)定了

2、不同培養(yǎng)時(shí)期菌絲體內(nèi)源皂苷含量、超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)酶活性及超氧陰離子和丙二醛(MDA)的含量，分析了內(nèi)源皂苷含量與抗氧酶酶活性之間的關(guān)系;研究了外源皂苷對(duì)菌絲體皂苷合成及抗氧化酶活性的影響，并在轉(zhuǎn)錄水平加以分析;跟蹤觀(guān)測(cè)了不同培養(yǎng)時(shí)間栽培料菌絲體中皂苷含量，搔菌后至子實(shí)體形成初期菌絲體中內(nèi)源皂苷含量、SOD和CAT酶活性、超氧陰離子和MDA的含量。
　　主要得出如下結(jié)論:
　　(1)正常菌株SIE

3、F3257和退化菌株SIEF3246菌絲體中的皂苷含量均隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸升高，但正常菌株的皂苷含量始終高于退化菌株;2個(gè)菌株SOD和CAT酶活性隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)呈下降趨勢(shì);丙二醛和超氧陰離子的含量逐漸升高，且正常菌株的含量要低于退化菌株;在菌絲快速生長(zhǎng)的第7-11 d皂苷含量與抗氧化酶活性呈正相關(guān)。
　　(2)添加0.01 g/L、0.05 g/L的外源皂苷可以提高內(nèi)源皂苷的含量，其對(duì)正常菌株的作用優(yōu)于對(duì)退化菌株的誘導(dǎo)的

4、作用;可以明顯提高正常菌株菌絲體內(nèi)超氧化物歧化酶和過(guò)氧化氫酶活性;當(dāng)外源皂苷的濃度為0.05 g/L時(shí)，在培養(yǎng)后期對(duì)退化菌株的超氧化物歧化酶活性反而有抑制作用;添加外源皂苷可以明顯上調(diào)正常菌株SIEF3257鯊烯合酶基因(SQS)基因表達(dá)，但是對(duì)退化菌株SIEF3246 SQS上調(diào)作用不顯著;能夠顯著上調(diào)正常菌株SIEF3257的Mn-SOD和CAT基因表達(dá)量，其基因表達(dá)量的變化趨勢(shì)與SOD酶活變化趨勢(shì)相似，但CAT基因表達(dá)量變化趨勢(shì)與

5、酶活性的變化并不相同。
　　(3)在栽培料中，自菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)栽培瓶至搔菌前，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)其菌絲體內(nèi)的皂苷含量先升高后逐漸趨于平穩(wěn)，其含量并不是隨著菌絲體培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而一直增多。在搔菌后至釘頭期的培養(yǎng)過(guò)程中其皂苷含量整體上升，此過(guò)程中菌絲體內(nèi)SOD和CAT酶活性都逐漸升高。
　　綜上所述，本研究證明了斑玉蕈菌絲體在快速生長(zhǎng)期其機(jī)體內(nèi)的內(nèi)源皂苷含量與抗氧化酶活性呈正相關(guān)，添加適量外源皂苷能夠提高斑玉蕈菌株內(nèi)源皂苷含量及抗氧化