紫莖澤蘭揮發(fā)油的提取分離及抗菌作用初探.pdf

1、目的：紫莖澤蘭(Eupatorium adenophorum Spreng)屬菊科澤蘭屬，原產(chǎn)地是中美洲墨西哥、牙買加一帶，由于其驚人的繁殖能力，20世紀(jì)中葉開始入侵中國(guó)，目前已在云南、四川、重慶、貴州、廣西等地區(qū)蔓延，對(duì)我國(guó)農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)和林業(yè)等造成了嚴(yán)重危害。為此，各地都紛紛開展多種方法進(jìn)行綜合治理。有研究資料表明，紫莖澤蘭莖葉的提取物對(duì)螨蟲、蚜蟲等具有殺滅能力，對(duì)番茄青枯菌等植物病原菌、對(duì)白色念珠菌等真菌和金黃色葡萄球菌等細(xì)菌也具有

2、殺滅活性。但是，紫莖澤蘭揮發(fā)油成分容易受地理環(huán)境、季節(jié)溫度等因素的影響，國(guó)內(nèi)外對(duì)紫莖澤蘭揮發(fā)油的抗菌作用研究資料也較少。本研究從攀西地區(qū)紫莖澤蘭中提取揮發(fā)油，對(duì)其β-欖香烯進(jìn)行分離鑒定，并對(duì)紫莖澤蘭揮發(fā)油的抗菌作用及機(jī)制進(jìn)行初步探討，為深度開發(fā)和利用紫莖澤蘭提供基礎(chǔ)資料。
　　方法：1.用水蒸汽蒸餾法從紫莖澤蘭中提取揮發(fā)油，硅膠柱層析法、銀離子配位色譜法從紫莖澤蘭揮發(fā)油中分離β-欖香烯，并用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定紫莖澤蘭揮

3、發(fā)油中β-欖香烯的含量。并通過(guò)UV、IR、1H-NMR、13C-NMR和HRMS對(duì)其分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行確認(rèn)。
　　2.用紙片擴(kuò)散法觀察紫莖澤蘭揮發(fā)油對(duì)金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大腸桿菌(Escherichia coli)和白色念珠菌(Candida albicans)的抑菌圈、用二倍管稀釋法測(cè)定紫莖澤蘭揮發(fā)油對(duì)金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度(MIC)。
　　3.通過(guò)測(cè)定電導(dǎo)率、生長(zhǎng)曲線法、SDS/

4、PAGE電泳、DAPI染色研究紫莖澤蘭揮發(fā)油對(duì)金黃色葡萄球菌細(xì)胞形態(tài)、菌體生長(zhǎng)情況、可溶性蛋白的表達(dá)和核酸合成的影響。
　　結(jié)果：紫莖澤蘭中β-欖香烯的含量為0.497％。紫荊澤蘭揮發(fā)油三種供試菌抗菌作用大小順序?yàn)椋航瘘S色葡萄球菌>白色念珠菌>大腸桿菌。紫莖澤蘭揮發(fā)油對(duì)金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度(MIC)是200μl/mL。紫莖澤蘭揮發(fā)油作用前后，金黃色葡萄球菌的電導(dǎo)率、生長(zhǎng)曲線、SDS/PAGE電泳譜帶和DAPI染色后的熒光現(xiàn)