電導(dǎo)檢測型DNA微陣列系統(tǒng)的研制.pdf

1、很少有科學(xué)領(lǐng)域象DNA檢測或診斷一樣在近年來有如此之快的發(fā)展.隨著人類基因組計(jì)劃的完成,它所提供的巨大的信息量為DNA檢測構(gòu)建起了一個(gè)平臺.在眾多的DNA檢測方法中,DNA傳感器以其操作簡單,儀器成本低廉,檢測快速等特點(diǎn)成為研究的熱點(diǎn).該論文的主要目的是研制一種基于電導(dǎo)檢測的DNA檢測系統(tǒng).它集成DNA雜交檢測和信號采集于一體,具有靈敏度高、選擇性好、體積小等特點(diǎn),可以適用于疾病檢測、生物鑒定等領(lǐng)域.論文的主要內(nèi)容如下:1.該文利用熒光

2、和同位素的標(biāo)記方法對DNA探針在玻璃基片上的固定與雜交過程進(jìn)行了系統(tǒng)地優(yōu)化,包括基片的清洗、手臂分子的選擇、固定、探針長短、雜交以及后處理等.得到了一套優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件,這樣可以在很大程度上保證得到均勻的而且強(qiáng)的雜交圖案.2.該文提出了一種簡單而通用的方法對基于納米金顆粒的DNA檢測方法進(jìn)行有效的放大.通過這種方法對DNA雜交的電學(xué)檢測放大后,雜交信號增強(qiáng)了至少3個(gè)數(shù)量級,同時(shí)沒有對該檢測方法的選擇能力產(chǎn)生影響.實(shí)驗(yàn)表明,該方法對DNA單

3、堿基的識別率達(dá)到了10<'9>:1.目前還沒有文獻(xiàn)報(bào)道過這么大的差別.3.該文應(yīng)用電導(dǎo)檢測的方法對PCR產(chǎn)物進(jìn)行了檢測,開發(fā)出了一套用于同時(shí)檢測多個(gè)PCR產(chǎn)物的方法,擴(kuò)大了電導(dǎo)檢測方法的應(yīng)用范圍.實(shí)驗(yàn)證實(shí)這種方法可以用于實(shí)際樣品的檢測,并且該方法對DNA單堿基的識別率也達(dá)到了10<'9>:1.4.該文利用標(biāo)準(zhǔn)微電子加工技術(shù)開發(fā)出兩種制備微米級DNA檢測單元的方法.一種是利用與微電子加工技術(shù)兼容的材料進(jìn)行選擇和處理,成功地實(shí)現(xiàn)了選擇性地將