2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、小麥赤霉病是小麥生產(chǎn)上一種重要的真菌病害,在世界各產(chǎn)麥國普遍發(fā)生。小麥赤霉病發(fā)病時導(dǎo)致小麥穗部呈現(xiàn)白穗癥狀,并導(dǎo)致谷粒感病。在造成嚴重經(jīng)濟損失的同時,感病麥粒中含有脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol)和玉米赤霉烯酮(zearalenon)等真菌毒素,食用后嚴重威脅著人、畜的生命健康。然而目前還沒有有效方法來控制赤霉病的發(fā)生,現(xiàn)階段主要利用殺菌劑來防治赤霉病,但大規(guī)模的使用化學(xué)藥劑給環(huán)境及生物帶來不利影響。因此,解析小麥赤霉

2、病菌的致病分子機制,可為尋找新的赤霉病菌防治方法提供理論依據(jù)。
  在真核生物的內(nèi)膜系統(tǒng)中,囊泡攜帶著蛋白、脂質(zhì)等物質(zhì),從供體運送到受體,在這個過程中膜融合作用起著重要作用。Mon1和Ccz1是在細胞質(zhì)向液泡定向運輸途徑(Cvt)中首先被發(fā)現(xiàn)的基因,更深入的研究表明Mon1和Ccz1在酵母液泡的同型融合和調(diào)控囊泡運輸過程中發(fā)揮重要作用。近期的文章表明,Mon1-Ccz1作為Rab7的鳥甘酸交換因子(GEF)調(diào)控胞吞作用。
 

3、 本文通過同源序列比對,在小麥赤霉病菌基因組數(shù)據(jù)庫中找到一個與酵母MON1同源的基因,命名為FgMON1。通過系統(tǒng)發(fā)育分析,發(fā)現(xiàn)Mon1在絲狀真菌的進化過程中是保守的。通過對小麥赤霉病菌中的FgMON1敲除后發(fā)現(xiàn)其在小麥赤霉病菌的生長發(fā)育、有性生殖和致病性及毒素的產(chǎn)生中起著重要作用。另外,我們還發(fā)現(xiàn)FgMon1參與小麥赤霉病菌的分生孢子的產(chǎn)生、孢子形態(tài)建成和菌絲細胞壁完整性過程。通過FM4-64染色發(fā)現(xiàn)ΔFgmon1突變體胞吞作用延緩,

4、CMAC染色發(fā)現(xiàn)突變體液泡融合受阻、細胞自噬過程受到影響。進而對FgMon1蛋白進行了亞細胞定位,發(fā)現(xiàn)該蛋白主要定位在小麥赤霉病菌分生孢子的液泡及胞質(zhì)中,這可能與其參與液泡融合、細胞自噬作用相關(guān)。通過酵母雙雜交和體外GST-pull down發(fā)現(xiàn)FgMon1與Rab GTPaseFgRab7存在互作關(guān)系。對FgRAB7敲除后發(fā)現(xiàn)其在小麥赤霉病菌的生長、致病性、膜泡融合及自噬過程中發(fā)揮重要作用。進一步研究發(fā)現(xiàn)FgMon1與FgRab7Q6

5、7L、FgRab7T22N都有互作關(guān)系。FgMon1可能作為FgRab7的GEF,能夠?qū)gRab7激活。上述結(jié)果表明,F(xiàn)gMon1與FgRab7作為關(guān)鍵組分調(diào)控囊泡運輸、胞吞作用和細胞自噬,進而影響小麥赤霉病菌的生長發(fā)育、致病性和毒素的產(chǎn)生。
  在酵母和哺乳動物細胞中,早期內(nèi)涵體發(fā)育成熟為晚期內(nèi)涵體需要Rab5到Rab7的轉(zhuǎn)化,Mon1-Ccz1復(fù)合物能被Rab5-GTP招募到晚期內(nèi)涵體膜上,同時Mon1-Ccz1作為Rab7

6、的GEF,能夠招募Rab7并將其激活,從而促進囊泡通過晚期內(nèi)涵體到液泡中進行降解。為了探究Rab5-Mon1-Rab7作用模塊在小麥赤霉病菌囊泡運輸過程中的作用,首先通過酵母雙雜發(fā)現(xiàn)FgMon1與Rab5在小麥赤霉病菌中的同源蛋白FgRab5A、FgRab5B都相互作用,進而對FgRAB5A、FgRAB5B的功能進行分析。利用同源重組原理,通過基因敲除的方法獲得相應(yīng)的突變體。結(jié)果表明Fgrab5A、Fgrab5B影響小麥赤霉病菌的營養(yǎng)生

7、長、有性生殖、分生孢子形成、致病力及毒素的合成,并且參與調(diào)控小麥赤霉病菌的液泡融合與胞吞作用。由此推測,F(xiàn)gMon1與FgRab5A、FgRab5B、FgRab7作為一個模塊共同調(diào)控囊泡運輸、胞吞作用和細胞自噬,進而影響小麥赤霉病菌的生長發(fā)育、致病性和毒素的產(chǎn)生。
  綜上所述,Rab蛋白、GEF和效應(yīng)蛋白SNARE蛋白構(gòu)成了一個Rab蛋白調(diào)控囊泡運輸?shù)淖饔媚K。本文通過對小麥赤霉病菌中囊泡運輸作用模塊相關(guān)基因FgMON1、FgR

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