三黃煎劑抑制PI3K-AKT信號通路降低ROS促進(jìn)乳腺癌他莫昔芬耐藥細(xì)胞凋亡的實驗研究.pdf

1、目的:探討三黃煎劑對MCF-7他莫昔芬耐藥（MCF-7/tamR）細(xì)胞氧化應(yīng)激水平、PI3K/AKT信號通路和凋亡的影響，并初步分析其內(nèi)在相關(guān)性。
　　方法:建立MCF-7/tamR細(xì)胞系，采用CCK-8法檢測他莫昔芬對乳腺癌細(xì)胞MCF-7、MCF-7/tamR增殖的影響，并檢測耐藥指數(shù);同時檢測三黃煎劑對MCF-7/tamR增殖的影響。免疫熒光法評價MCF-7、MCF-7/tamR及各給藥組的ROS的水平;流式細(xì)胞儀檢測各實驗組

2、細(xì)胞凋亡情況;Western Blot法檢測三黃煎劑對MCF-7/tamR細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)對的影響，同時檢測三黃煎劑對MCF-7/tamR細(xì)胞PI3K/AKT信號通路蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:成功構(gòu)建了MCF-7/tamR細(xì)胞株，細(xì)胞形態(tài)上發(fā)生改變，且對他莫昔芬的抵抗能力得到了增強，其RI指數(shù)為3.61±0.35(p＜0.05)，相較于野生型的MCF-7細(xì)胞系，ROS水平升高，MCF-7/tamR細(xì)胞株凋亡率由5.2％下降至

3、3.98％，且Bcl-2活性上升，Bax/Bak比值降低，且PI3K/AKT通路明顯激活，PTEN表達(dá)缺失。三黃煎劑對MCF-7/tamR細(xì)胞株有明顯的抑制作用，IC50值為4.28±0.06mg·mL-1，三黃煎劑能夠使MCF-7/tamR細(xì)胞株的凋亡率上升為6.46％和8.95％，同時能夠下調(diào)MCF-7/tamR細(xì)胞的Bcl-2活性，上調(diào)Bax/Bak。能夠降低耐藥細(xì)胞株的ROS水平，抑制PI3K/AKT信號通路，提高抑癌基因PTE