IKKε在子宮內(nèi)膜癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:檢測(cè)IKKε在子宮內(nèi)膜癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)以及抑制IKKε表達(dá)后對(duì)內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖、凋亡能力的影響，探討IKKε在子宮內(nèi)膜癌中的作用和臨床意義。
　　方法:(1)選取2011年01月至2014年09月期間大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科存檔的手術(shù)切除、石蠟包埋子宮內(nèi)膜癌組織標(biāo)本107例，從中隨機(jī)選取33例子宮內(nèi)膜癌并將與其配對(duì)的33例癌旁正常子宮內(nèi)膜組織設(shè)為對(duì)照組，應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)IKKε蛋白在這兩種類型子宮內(nèi)膜組織中的表

2、達(dá)，對(duì)該107例患者進(jìn)行隨訪，并分析IKKε與子宮內(nèi)膜癌患者臨床病理因素之間的關(guān)系;(2)體外培養(yǎng)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞Ishikawa（高分化）、HEC-1A（中分化）、HEC-1B（中分化）和AN3CA（未分化），應(yīng)用蛋白印跡法(Western Blot)分別檢測(cè)這四種內(nèi)膜癌細(xì)胞中IKKε蛋白的表達(dá)水平，以及IKKε抑制劑A(Malachite Green Oxalate)(0μM、0.1μM、0.5μM)作用48h后對(duì)Ishikawa、H

3、EC-1A、HEC-1B和AN3CA細(xì)胞中IKKε蛋白表達(dá)的影響;(3) MTT比色法檢測(cè)不同濃度IKKε抑制劑A(0-25μM)作用48h后對(duì)四種內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖能力的影響;(4)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)IKKε抑制劑A(0μM、0.1μM、0.5μM)作用48h后對(duì)四種內(nèi)膜癌細(xì)胞凋亡率的影響。
　　結(jié)果:(1) IKKε主要表達(dá)于細(xì)胞漿，在癌旁正常子宮內(nèi)膜組織和子宮內(nèi)膜癌組織中高表達(dá)率分別為51.5％和72.7％，子宮內(nèi)膜癌組織中的IKK

4、ε表達(dá)明顯高于癌旁正常子宮內(nèi)膜組織，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.076＞0.05);此外，子宮內(nèi)膜癌組織中IKKε蛋白的表達(dá)強(qiáng)度與患者年齡、FIGO分期、組織病理學(xué)分級(jí)、病理分型、浸潤(rùn)深度、血清CA125水平、是否合并高血壓、糖尿病以及存活時(shí)間均無(wú)明顯相關(guān)性(P＞0.05);(2) IKKε蛋白在Ishikawa、HEC-1A、HEC-1B和AN3CA細(xì)胞中均有不同程度的表達(dá)，IKKε抑制劑A(0.1μM、0.5μM)分別作用于Ishika

5、wa、HEC-1A、HEC-1B和AN3CA細(xì)胞48h后，IKKε蛋白表達(dá)水平隨著抑制劑濃度升高均有不同程度降低，呈濃度依賴性;(3) MTT結(jié)果提示，不同濃度IKKε抑制劑A對(duì)四種內(nèi)膜癌細(xì)胞均有不同程度的增殖抑制作用，且抑制作用具有濃度依賴性，隨抑制劑濃度的增加，其對(duì)細(xì)胞的增殖抑制作用逐漸增強(qiáng)，Ishikawa、HEC-1A、HEC-1B和AN3CA的IC50分別為0.1343μM、0.4306μM、1.073μM和0.07929μM

6、，各濃度組細(xì)胞生存率均低于對(duì)照組，尤其對(duì)Ishikawa和AN3 CA的增殖抑制作用，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);(4)IKKε抑制劑A(0.1μM、0.5μM)分別作用Ishikawa、HEC-1A、HEC-1B和AN3CA細(xì)胞48h后，可顯著引起Ishikawa和AN3CA細(xì)胞發(fā)生凋亡并呈濃度依賴性，凋亡倍數(shù)均隨抑制劑濃度的增加而增加，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);但I(xiàn)KKε抑制劑A引起的HEC-1A和HEC-1B細(xì)

7、胞凋亡與對(duì)照組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論:IKKε在子宮內(nèi)膜癌組織中呈高表達(dá)，在體外培養(yǎng)的四種子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中呈不同程度表達(dá)，中分化的的內(nèi)膜癌細(xì)胞中IKKε表達(dá)明顯高于高分化和低分化的內(nèi)膜癌細(xì)胞;IKKε抑制劑A下調(diào)IKKε后，可不同程度地抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡，且隨著藥物濃度的增加，增殖抑制作用增強(qiáng)，凋亡倍數(shù)增加，特別是對(duì)IKKε表達(dá)偏低的Ishikawa和AN3CA細(xì)胞的作用尤為顯著。