低分子肝素及尿激酶改善DCD腎臟對長時間熱缺血耐受的實驗研究.pdf

1、目的:
　　探討常溫ECMO支持下應(yīng)用低分子肝素及尿激酶改善DCD供腎對長時間熱缺血耐受的效能以及尿激酶對長時間熱缺血(WI)腎臟的形態(tài)和功能恢復(fù)的影響，為臨床應(yīng)用此類腎臟提供實驗依據(jù)。
　　方法:
　　1、健康成年家兔49只，雌雄均可，隨機分為7組:假手術(shù)組（SO組）;缺血60min、90min、120min對照/實驗組(A0/A1、B0/B1、C0/C1組)。無損傷血管夾同時夾閉左側(cè)腎動、靜脈，到達(dá)設(shè)定時間后恢復(fù)腎

2、臟血供模擬常溫ECMO支持下腎臟灌注，此時給予尿激酶、低分子肝素處理（實驗組），對照組給予相同量的生理鹽水。2h后再次夾閉左側(cè)腎動、靜脈阻斷左側(cè)腎臟血流，然后穿刺血管以0～4℃的HCA液原位灌注最后恢復(fù)血供以模擬原位腎臟移植。比較各組手術(shù)前后血肌酐(Cr)水平變化、各組術(shù)后24h血流動力學(xué)差異，觀察腎組織病理（HE、Masson染色）和血栓調(diào)節(jié)蛋白(Thrombomodulin，TM)表達(dá)的改變。
　　2、30只成年健康家兔隨機分

3、為3組:假手術(shù)、熱缺血組(WI組)、熱缺血+尿激酶治療組(WI+UK組)。利用無損傷血管夾夾閉左側(cè)腎動、靜脈90 min模擬熱缺血過程，然后以0～4℃的HCA液原位灌注左側(cè)腎臟，最后恢復(fù)血供以模擬自體原位腎移植。術(shù)后WI+UK組給予尿激酶溶栓處理，其余2組僅予等量生理鹽水。比較各組血肌酐(Cr)、腎臟組織病理改變（HE、Masson染色）和免疫組化檢測血栓調(diào)節(jié)蛋白(Thrombomodulin，TM)。
　　結(jié)果:
　　1、

4、①Cr水平與假手術(shù)相比較:缺血60min對照組及缺血90min、120min的對照/實驗組術(shù)后35天Cr水平均明顯高于假手術(shù)組，缺血60min實驗組Cr水平與假手術(shù)組無明顯差別;實驗/對照組相比較:缺血60min、90min實驗組術(shù)后35天Cr水平明顯低于其對照組，缺血120min實驗組與對照組無明顯差異;術(shù)前與術(shù)后相比較:缺血60min實驗組術(shù)后35天Cr水平與術(shù)前無明顯差別，缺血60min對照組及缺血90min、120min的對照/

5、實驗組術(shù)后35天Cr水平明顯高于各自術(shù)前;Cr水平變化趨勢可見:模擬透析治療時，Cr水平一定程度升高，切除健側(cè)腎臟后，Cr水平較透析時明顯升高。②術(shù)后24h，缺血90min實驗組阻力指數(shù)（RI）明顯低于對照組，假手術(shù)組、缺血60min、120min組實驗組和對照組無明顯差異;缺血90min、120min實驗/對照組均明顯高于假手術(shù)組。③隨著熱缺血時間增加，腎小球及腎小管損傷程度加重、血管內(nèi)微血栓數(shù)量增加，TM蛋白表達(dá)明顯升高;與各自對照

6、組相比，損傷減輕及微血栓減少，缺血90min、120min的實驗組TM蛋白表達(dá)明顯低于相應(yīng)對照組。
　　2、①與假手術(shù)組相比，WI組和WI+UK組術(shù)后Cr水平明顯升高，術(shù)后35天Cr水平WI+UK組（118.99±17.18）μmol/L明顯低于WI組（165.34±8.38）μmol/L。②WI組腎小球內(nèi)大量微血栓形成，腎小管水腫、壞死;WI+UK組腎小球未見血栓，腎小管未見異常。③WI組TM表達(dá)明顯高于假手術(shù)組，WI+UK組明