黃鱔嗜水氣單胞菌病和溫和氣單胞菌病防治研究.pdf

1、黃鱔(Monopterus albus)不僅有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，且有重要的藥用價(jià)值，深受消費(fèi)者青睞。目前已在除西藏、東三省以外的全國(guó)各地養(yǎng)殖，尤其以四川、湖北、江西等地最廣。由于黃鱔的人工養(yǎng)殖歷史較短，并且以前的研究多集中于繁殖，飼養(yǎng)等方面，因此對(duì)黃鱔疾病一直沒(méi)有有效的防治措施。黃鱔嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌是危害黃鱔養(yǎng)殖業(yè)較為重要的兩種疾病，且這兩種疾病經(jīng)常混合感染，因此研制能預(yù)防這兩種疾病的二聯(lián)疫苗和有效的復(fù)方中草藥必將大大促進(jìn)黃鱔養(yǎng)

2、殖業(yè)的發(fā)展。本研究從二聯(lián)疫苗和中藥防治兩方面對(duì)黃鱔疾病的防治進(jìn)行研究，檢測(cè)了二聯(lián)疫苗的免疫效果，中藥的體外抑菌效果。
　　 1嗜水氣單胞菌與溫和氣單胞菌最佳滅活條件的優(yōu)化
　　 選用不同的營(yíng)養(yǎng)源，不同的培養(yǎng)溫度，不同的pH值對(duì)嗜水氣單胞菌，溫和氣單胞菌培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明嗜水氣單胞菌最佳培養(yǎng)條件為：普通肉湯中加入1％胰蛋白胨，溫度為37℃，pH值為7.5；溫和氣單胞菌最佳培養(yǎng)條件為：普通肉湯中加入1％胰蛋白胨，溫度

3、為28℃，pH值為7.5。將兩種細(xì)菌擴(kuò)大培養(yǎng)后按照1：1的比例混合，加入0.2％福爾馬林（終濃度），滅活溫度28℃，滅活36h制成二聯(lián)滅活苗的沉淀線最強(qiáng)。
　　 2嗜水氣單胞菌與溫和氣單胞菌二聯(lián)疫苗對(duì)黃鱔的免疫效果
　　 用嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌菌體制成二聯(lián)疫苗，以腹腔注射的方式免疫黃鱔。檢測(cè)免疫黃鱔血清抗體效價(jià)、IgM含量、溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活性、補(bǔ)體C3以及對(duì)嗜水氣單胞菌，溫和氣單胞菌攻毒的免疫保護(hù)率，評(píng)

4、價(jià)該二聯(lián)苗對(duì)黃鱔的免疫效果。結(jié)果表明二聯(lián)疫苗免疫黃鱔后誘導(dǎo)的抗體效價(jià)在-免后的第4周達(dá)到最高，然后下降，加強(qiáng)免疫后在第6周達(dá)到最高，隨后開始下降，抗嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌的效價(jià)均為2667，而空白對(duì)照組在整個(gè)試驗(yàn)期間未能檢測(cè)到抗嗜水氣單胞菌、抗溫和氣單胞菌效價(jià)；免疫后黃鱔的IgM含量，血清溶菌酶和超氧化物岐化酶，補(bǔ)體C3分別為：0.5020±0.008mg/mL，12.27±0.17ug/mL，33.96±0.15U/mL，0.10

5、54±0.0049mg/mL。免疫8周后分別用兩種病原菌攻毒，二聯(lián)疫苗對(duì)黃鱔嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌攻毒的免疫保護(hù)率分別為56.67％和46.67％。試驗(yàn)表明該二聯(lián)疫苗對(duì)黃鱔兩種細(xì)菌病可起到一定的預(yù)防效果。
　　 3復(fù)合佐劑對(duì)黃鱔的免疫效果
　　 二聯(lián)苗＋復(fù)合佐劑組能更好地增強(qiáng)黃鱔的非特異性和特異性免疫，對(duì)嗜水氣單胞菌與溫和氣單胞菌攻毒后的免疫保護(hù)率分別為63.67％，53.67％。與無(wú)佐劑組相比免疫保護(hù)率提高了7％。

6、研究結(jié)果表明黃芪多糖和左旋咪唑能更好地增強(qiáng)嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌的免疫原性和免疫保護(hù)力。
　　 4中草藥對(duì)嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌抑菌效果
　　 采用牛津杯法和二倍稀釋法，選擇五倍子、黃芩、楊樹花、連翹、大黃等10種中草藥對(duì)患病黃鱔上分離到的10株嗜水氣單胞菌和1株溫和氣單胞菌進(jìn)行了體外抑菌試驗(yàn)。在此基礎(chǔ)上，按照中獸醫(yī)配伍的特點(diǎn)初步篩選了5種中草藥組成4個(gè)復(fù)方(A、B、C、D)，并選擇1株嗜水氣單胞菌和1株溫和氣單