黃鱔嗜水氣單胞菌病和溫和氣單胞菌病防治研究.pdf

1、黃鱔(Monopterus albus)不僅有豐富的營養(yǎng)價值，且有重要的藥用價值，深受消費者青睞。目前已在除西藏、東三省以外的全國各地養(yǎng)殖，尤其以四川、湖北、江西等地最廣。由于黃鱔的人工養(yǎng)殖歷史較短，并且以前的研究多集中于繁殖，飼養(yǎng)等方面，因此對黃鱔疾病一直沒有有效的防治措施。黃鱔嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌是危害黃鱔養(yǎng)殖業(yè)較為重要的兩種疾病，且這兩種疾病經(jīng)?；旌细腥荆虼搜兄颇茴A(yù)防這兩種疾病的二聯(lián)疫苗和有效的復方中草藥必將大大促進黃鱔養(yǎng)

2、殖業(yè)的發(fā)展。本研究從二聯(lián)疫苗和中藥防治兩方面對黃鱔疾病的防治進行研究，檢測了二聯(lián)疫苗的免疫效果，中藥的體外抑菌效果。
　　 1嗜水氣單胞菌與溫和氣單胞菌最佳滅活條件的優(yōu)化
　　 選用不同的營養(yǎng)源，不同的培養(yǎng)溫度，不同的pH值對嗜水氣單胞菌，溫和氣單胞菌培養(yǎng)條件進行優(yōu)化，結(jié)果表明嗜水氣單胞菌最佳培養(yǎng)條件為：普通肉湯中加入1％胰蛋白胨，溫度為37℃，pH值為7.5；溫和氣單胞菌最佳培養(yǎng)條件為：普通肉湯中加入1％胰蛋白胨，溫度

3、為28℃，pH值為7.5。將兩種細菌擴大培養(yǎng)后按照1：1的比例混合，加入0.2％福爾馬林（終濃度），滅活溫度28℃，滅活36h制成二聯(lián)滅活苗的沉淀線最強。
　　 2嗜水氣單胞菌與溫和氣單胞菌二聯(lián)疫苗對黃鱔的免疫效果
　　 用嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌菌體制成二聯(lián)疫苗，以腹腔注射的方式免疫黃鱔。檢測免疫黃鱔血清抗體效價、IgM含量、溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活性、補體C3以及對嗜水氣單胞菌，溫和氣單胞菌攻毒的免疫保護率，評

4、價該二聯(lián)苗對黃鱔的免疫效果。結(jié)果表明二聯(lián)疫苗免疫黃鱔后誘導的抗體效價在-免后的第4周達到最高，然后下降，加強免疫后在第6周達到最高，隨后開始下降，抗嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌的效價均為2667，而空白對照組在整個試驗期間未能檢測到抗嗜水氣單胞菌、抗溫和氣單胞菌效價；免疫后黃鱔的IgM含量，血清溶菌酶和超氧化物岐化酶，補體C3分別為：0.5020±0.008mg/mL，12.27±0.17ug/mL，33.96±0.15U/mL，0.10

5、54±0.0049mg/mL。免疫8周后分別用兩種病原菌攻毒，二聯(lián)疫苗對黃鱔嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌攻毒的免疫保護率分別為56.67％和46.67％。試驗表明該二聯(lián)疫苗對黃鱔兩種細菌病可起到一定的預(yù)防效果。
　　 3復合佐劑對黃鱔的免疫效果
　　 二聯(lián)苗＋復合佐劑組能更好地增強黃鱔的非特異性和特異性免疫，對嗜水氣單胞菌與溫和氣單胞菌攻毒后的免疫保護率分別為63.67％，53.67％。與無佐劑組相比免疫保護率提高了7％。

6、研究結(jié)果表明黃芪多糖和左旋咪唑能更好地增強嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌的免疫原性和免疫保護力。
　　 4中草藥對嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌抑菌效果
　　 采用牛津杯法和二倍稀釋法，選擇五倍子、黃芩、楊樹花、連翹、大黃等10種中草藥對患病黃鱔上分離到的10株嗜水氣單胞菌和1株溫和氣單胞菌進行了體外抑菌試驗。在此基礎(chǔ)上，按照中獸醫(yī)配伍的特點初步篩選了5種中草藥組成4個復方(A、B、C、D)，并選擇1株嗜水氣單胞菌和1株溫和氣單