中華鱉養(yǎng)殖水質(zhì)調(diào)控及嗜水氣單胞菌緩釋疫苗研制.pdf

1、溫室集約化養(yǎng)殖是我國(guó)中華鱉養(yǎng)殖業(yè)中最重要的一種養(yǎng)殖方式。隨著中華鱉養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，這種養(yǎng)殖模式的弊端凸現(xiàn)：養(yǎng)殖水體惡化嚴(yán)重，有益的菌群和必需的浮游動(dòng)植物受到抑制，中華鱉品質(zhì)下降，水中氣單胞菌屬的多種致病菌加速繁殖，成為優(yōu)勢(shì)菌群。而在現(xiàn)階段多采用大排大注的方式解決水質(zhì)下降問(wèn)題，既導(dǎo)致了水資源的浪費(fèi)，又污染了周?chē)h(huán)境；在中華鱉多種病癥的病灶部位均可以分離得到嗜水氣單胞菌，這也說(shuō)明了氣單胞菌屬的嗜水氣單胞菌Aeromonas hydroph

2、ila是中華鱉多種疾病的病原菌。因此，保證中華鱉的優(yōu)質(zhì)生長(zhǎng)環(huán)境以及抑制可以導(dǎo)致多種疾病爆發(fā)的嗜水氣單胞菌變得尤為重要。本實(shí)驗(yàn)在中華鱉養(yǎng)殖中采用了3種節(jié)水型漁業(yè)養(yǎng)殖新技術(shù)，研究其對(duì)水質(zhì)是否有改良作用，并通過(guò)研制嗜水氣單胞菌口服緩釋疫苗，試圖從免疫防治角度解決中華鱉嗜水氣單胞菌病問(wèn)題。
　　1實(shí)驗(yàn)中采用3種節(jié)水型漁業(yè)養(yǎng)殖技術(shù)：使用微生態(tài)制劑（全池潑灑益水素，飼料中添加納豆命）；浮床栽培空心菜；套養(yǎng)清道夫魚(yú)，研究上述3種方式對(duì)養(yǎng)殖水質(zhì)的

3、影響。結(jié)果顯示：1）微生態(tài)制劑試驗(yàn)：全池潑灑益水素與飼料添加納豆命的實(shí)驗(yàn)組的水體細(xì)菌總數(shù)由最初8.5×104 cfu/mL降低至7.1×104 cfu/mL，嗜水氣單胞菌數(shù)量由2.3×104 cfu/mL降低至8×103 cfu/mL，芽孢桿菌數(shù)量由4×103 cfu/mL上升至1×104 cfu/mL；2）空心菜試驗(yàn)：15%水面浮床栽培空心菜實(shí)驗(yàn)組到實(shí)驗(yàn)中期的數(shù)據(jù)顯示總氮增長(zhǎng)率為30.2%、總磷增長(zhǎng)率為6.8%、COD增長(zhǎng)率為45.6

4、%，硝酸氮增長(zhǎng)率為41.7%、亞硝酸氮增長(zhǎng)率為0%、葉綠素去除率為8.3%，與此同時(shí)對(duì)照組總氮增長(zhǎng)率為66.1%、總磷增長(zhǎng)率為1.6%、COD增長(zhǎng)率為66.9%，硝酸氮增長(zhǎng)率為118.8%、亞硝酸氮增長(zhǎng)率為84.6%、葉綠素增長(zhǎng)率為14.3%；3）清道夫試驗(yàn)：套養(yǎng)清道夫魚(yú)實(shí)驗(yàn)組到實(shí)驗(yàn)中期的采樣數(shù)據(jù)顯示總氮增長(zhǎng)率為49.7%、總磷增長(zhǎng)率為4.3%、COD增長(zhǎng)率為34.2%，硝酸氮增長(zhǎng)率為88.3%、亞硝酸氮增長(zhǎng)率為63.6%、葉綠素去除率

5、為2.4%，而對(duì)照組總氮增長(zhǎng)率為63.4%、總磷增長(zhǎng)率為4.1%、COD增長(zhǎng)率為60.5%，硝酸氮增長(zhǎng)率為95.0%、亞硝酸氮增長(zhǎng)率為133.3%、葉綠素增長(zhǎng)率為16.7%。實(shí)驗(yàn)證明，在改善水質(zhì)過(guò)程中，采用微生態(tài)制劑可以改善水體中的微生態(tài)，芽孢桿菌的數(shù)量增加可以明顯減少水體中競(jìng)爭(zhēng)菌種的數(shù)量，并導(dǎo)致嗜水氣單胞菌數(shù)顯著下降。浮床栽培空心菜以及套養(yǎng)清道夫魚(yú)對(duì)水化學(xué)指標(biāo)有較好的控制作用。
　　2利用氨芐青霉素麥康凱瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基從養(yǎng)殖水體

6、中分離得到嗜水氣單胞菌，福爾馬林滅活，包裹于聚（乳酸-羥基乙酸）共聚物(PLGA)中，制成緩釋微球，口服免疫中華鱉。結(jié)果顯示：通過(guò)對(duì)此菌進(jìn)行生理生化特性分析，菌落形態(tài)和菌體特征證實(shí)了分離的細(xì)菌為嗜水氣單胞菌。緩釋微球疫苗體外釋放可持續(xù)近40 d；中華鱉的免疫應(yīng)答結(jié)果顯示：血清抗體效價(jià)可達(dá)1:512、白細(xì)胞吞噬率可達(dá)71.25%、白細(xì)胞吞噬指數(shù)可達(dá)1.51、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率可達(dá)77.25%，實(shí)驗(yàn)前30 d與注射滅活菌液疫苗沒(méi)有顯著性差異（P