核酸適體分離細(xì)菌內(nèi)毒素的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、核酸適體是一類寡核苷酸，其對不同的靶標(biāo)有著特異且高效的親和力，可以結(jié)合不同的目標(biāo)。本論文篩選了一種針對細(xì)菌內(nèi)毒素的核酸適體，并開展了將其應(yīng)用于內(nèi)毒素分離的研究。
　　基于SELEX(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment)篩選技術(shù)，經(jīng)過15輪正篩和5輪反篩，共得到13個(gè)克隆子，測序，獲得1條高頻序列，命名為 EAQ3。通過DNAMAN6.0.3.99軟件對

2、13條序列進(jìn)行一級結(jié)構(gòu)和二級結(jié)構(gòu)分析，結(jié)果表明，一級結(jié)構(gòu)分析表明這13條序列的一致性為75.15％，其中：隨機(jī)序列區(qū)域中大多數(shù)富含G、C堿基；有25條序列的隨機(jī)序列區(qū)域以T，G結(jié)尾。所以很有可能隨機(jī)序列區(qū)域中的G、C堿基和T、G尾巴與靶標(biāo)的結(jié)合有關(guān)。二級結(jié)構(gòu)分析表明所有13條序列都形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)，其中EAQ3有可能形成G-四聚體結(jié)構(gòu)。
　　對三條序列EAQ1，EAQ2，EAQ3與內(nèi)毒素結(jié)合的親和性和特異性測定。檢測結(jié)果表明，EAQ3

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