甘薯莖尖的超低溫保存及其再生植株的研究.pdf

1、以往常用的甘薯種質資源保存方法都有著各自的局限性，而超低溫冷凍保存技術在甘薯種質資源保存上的研究和應用鮮有報道。相對于以往甘薯種質資源的保存方法，超低溫冷凍保存技術有其獨特的優(yōu)勢,并有著廣闊的應用前景，它不僅可以保存種質的遺傳穩(wěn)定性，而且能清除種質內的病原物，強化其生活力。本研究通過優(yōu)化包埋玻璃化法冷凍技術的主要影響因子，對甘薯莖尖超低溫保存的過程進行了系統(tǒng)的優(yōu)化配置，獲得了甘薯主栽品種徐薯18號和濟薯21號適宜的超低溫冷凍條件，并進一

2、步探索莖尖的再生方法。具體做法如下:
　　 1.采用正交試驗對超低溫保存體系進行了優(yōu)化，實驗結果表明:玻璃化溶液處理時間為主要影響因素.而6-BA濃度為0.5mg·L-1的培養(yǎng)基上的長度為1-1.5mm的莖尖，PVS2處理90min,超低溫保存效果最好。
　　 2.做單因子試驗,利用正交試驗結果，只變化單因子，其它處理步驟按最佳組合進行系統(tǒng)優(yōu)化:
　　 (1)在以正交試驗結果為基礎，研究各單因子對超低溫保存體系的

3、影響，結果如下:不同的6-BA濃度水平試驗中發(fā)現(xiàn),6-BA濃度為0.5mg·L-1的MS培養(yǎng)基上生長出來的側芽，經(jīng)冷凍后均得到較高的存活率。
　　 (2)在不同大小的莖尖試驗中發(fā)現(xiàn):1-1.5mm大小的莖尖成活率可達到80％，而＜1mm和1.5-3mm莖尖成活率則低于50％。
　　 (3)在不同玻璃化溶液處理時間試驗中發(fā)現(xiàn):未經(jīng)PVS2處理的和處理30min的幾乎全部死亡，而處理90min的莖尖存活率達80％以上，取得了