乳清蛋白納米載體與腸粘液層滲透性的構(gòu)效關(guān)系研究.pdf

1、位于人體胃腸道表面的粘液層是一種粘彈性凝膠層，它能夠有效的捕獲和移除病原體等外來顆粒，但也限制了藥物遞送系統(tǒng)的有效擴散和吸收。目前研究較多的粘膜粘附納米顆粒雖然能夠延長其在胃腸道的滯留和釋放時間，但是由于胃腸道內(nèi)粘液層的不斷更新，很大程度限制了納米載藥體系的遞送效果。因此提高納米顆粒的粘液穿透能力可以避免藥物被快速清除，實現(xiàn)納米載體的有效遞送。目前快速發(fā)展的納米技術(shù)通過對納米載體的理化性質(zhì)的不斷創(chuàng)新以克服這種生理障礙。事實上，大多數(shù)在粘

2、液中具有高遷移率的細菌具有棒狀形狀，說明形狀可能會影響顆粒的粘液穿透能力。本文以生物可降解材料乳清蛋白為原料，構(gòu)建了具有不同形狀和粒徑的四種納米顆粒，利用Transwell滲透擴散和MPT(Muptiple Particle Tracking)法兩種技術(shù)考察了不同納米顆粒在腸粘液層中的擴散速率。利用Caco-2/E12共培養(yǎng)細胞模型考察不同納米顆粒的細胞攝取和跨膜運輸能力。同時利用該模型研究納米顆粒在粘液層中的行為以及它所介導(dǎo)的細胞內(nèi)化

3、機制和打開緊密連接的能力。
　　論文的研究內(nèi)容如下:
　　1.探究不同納米顆粒在腸粘液層中的滲透能力。制備了四種具有不同粒徑和形狀的乳清蛋白納米顆粒，分別是NS(30nm)，BNS(300nm)，LNT(20×800nm)和SNT(20×200nm)，它們的電勢均為-20mV左右。利用Transwell小室擴散法和MPT法兩種方法證明了粒徑和形狀對納米顆粒穿透腸粘液層有影響，四種納米顆粒在腸粘液中的擴散速率順序為:BNS＜L

4、NT＜NS＜SNT。同時擴散速率更快的納米顆粒SNT在腸粘液層中具有更深層次的分布，可見粒徑較小的管狀納米顆粒具有潛在的穿透腸粘液層的能力。
　　2.成功構(gòu)建了Caco-2/E12共培養(yǎng)模型，探究不同納米載體的跨膜運輸能力。結(jié)果表明，四種納米顆粒在共培養(yǎng)細胞上的毒副作用很低，說明乳清蛋白納米顆粒具有良好的生物相容性。用NAC清除共培養(yǎng)細胞上的粘液層后，四種載體在細胞水平上的攝取和轉(zhuǎn)運能力均有所提高。說明粘液層確實是納米顆粒吸收的屏