脫氫抗壞血酸在低溫誘導(dǎo)煙草早花過程中的作用及其信號途徑分析.pdf

1、溫度是影響煙草農(nóng)作物生長發(fā)育的重要環(huán)境因子。作為低溫敏感植物，煙草移栽前后若受到13-18℃的低溫并持續(xù)一周左右，即可引起葉片未長夠正常數(shù)目即現(xiàn)蕾的早花現(xiàn)象。煙草早花會造成煙葉產(chǎn)量和質(zhì)量下降，從而降低農(nóng)民的收益，影響煙葉生產(chǎn)。已有實(shí)驗(yàn)表明脫氫抗壞血酸（dehydroascorbate，DHA）在低溫誘導(dǎo)煙草成花過程中起作用。因此，明確DHA在低溫誘導(dǎo)煙草早花中的作用及其信號途徑，對于解決煙草早花問題非常重要。
　　 本研究以栽培

2、煙草(Nicotiana tabaccum)K326為實(shí)驗(yàn)材料，發(fā)現(xiàn)4℃連續(xù)處理7天能有效誘導(dǎo)花原基組織的形成。對煙草整株或整株上的一片葉4℃處理一天，都引起莖頂端分生組織中DHA含量的升高、SOC1和LLFY表達(dá)量的上調(diào)。為進(jìn)一步明確DHA是否影響植物開花關(guān)鍵基因SOC1和LFY的表達(dá)，用DHA、AsA直接處理了正常培養(yǎng)的煙草莖頂端分生組織，發(fā)現(xiàn)只有DHA能引起SOC1和LFY的上調(diào)表達(dá)。
　　 保衛(wèi)細(xì)胞是研究植物信號途徑的模

3、式系統(tǒng)。將MAPK、NADPH氧化酶、鈣通道等相關(guān)分子的抑制劑和DHA共處理煙草葉片下表皮條，檢測保衛(wèi)細(xì)胞形成的氣孔的開度變化，從而分析DHA的信號途徑。與對照和DHA處理的結(jié)果相比，MAPK、NADPH氧化酶、PTPase的抑制劑都能有效逆轉(zhuǎn)DHA誘導(dǎo)的氣孔關(guān)閉現(xiàn)象。而在添加DHA的同時添加DHA的轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑——細(xì)胞松弛素B，也能使DHA誘導(dǎo)的氣孔關(guān)閉現(xiàn)象幾乎恢復(fù)至對照水平。證明DHA信號途徑可能一方面經(jīng)由H2O2信號途徑，另一方面還