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1、本研究對(duì)烤煙品種K326進(jìn)行整株和單葉的低溫脅迫處理,檢測(cè)了煙株不同部位組織器官的蔗糖含量和抗壞血酸氧化還原狀態(tài)的變化及其相關(guān)酶活性,并對(duì)煙草開(kāi)花相關(guān)基因的表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)分析,以期探尋低溫誘導(dǎo)煙草早花的相關(guān)調(diào)控因子。在實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證階段,通過(guò)對(duì)芽體外施加蔗糖、抗壞血酸、DHA等,檢測(cè)芽中開(kāi)花相關(guān)基因的表達(dá)情況,從而確定其在誘導(dǎo)開(kāi)花相關(guān)基因表達(dá)中的主導(dǎo)作用,研究結(jié)果如下: 1.低溫促使蔗糖向頂端分生組織快速轉(zhuǎn)運(yùn)。對(duì)低溫脅迫下煙草植株
2、地上部分各組織器官中與蔗糖合成相關(guān)基因的表達(dá)水平、酶活性、蔗糖含量、蔗糖運(yùn)轉(zhuǎn)走向進(jìn)行了系統(tǒng)研究,并進(jìn)行組織染色確定淀粉在葉片不同區(qū)域的積累分布狀況。發(fā)現(xiàn)低溫處理后,葉片中可溶性糖含量升高,蔗糖磷酸合成酶SPS活性升高,淀粉酶活性降低,淀粉在葉脈處積累增加,葉片中SPSC表達(dá)量顯著升高,葉脈中蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)體SUT1基因表達(dá)量上升,蔗糖從葉片經(jīng)由側(cè)脈、葉柄和莖向頂端分生組織的轉(zhuǎn)運(yùn)增加,單葉處理也顯示這種趨勢(shì),頂芽中蔗糖含量分別增加了60.22%
3、和16.55%,這種現(xiàn)象主要由葉片中的SPS活性提高和側(cè)脈中SUT1的表達(dá)量增加所致,而并非由淀粉的降解導(dǎo)致。 2.低溫導(dǎo)致抗壞血酸庫(kù)趨于氧化態(tài)勢(shì)。低溫處理后,葉片中抗壞血酸總量下降,葉柄、莖和芽中AsA變化不大或少量上升,但DHA含量呈梯度上升,其在P,S,AM增幅分別為整株處理:3.09%,25.05%,22.45%,單葉處理:16.15%,5.81%,19.73%,表明低溫脅迫促使了芽中DHA含量的提升,AsA含量在芽中變
4、化不大,(AsA+DHA)總量的升高主要由于DHA的升高造成的,芽中抗壞血酸趨于氧化態(tài)升高趨勢(shì)。 3.低溫誘導(dǎo)成花相關(guān)基因表達(dá)水平上調(diào)。檢測(cè)開(kāi)花相關(guān)基因表達(dá)情況顯示低溫處理后,芽中SOC1表達(dá)量顯著增加,單葉處理也會(huì)造成相似的表達(dá)調(diào)控結(jié)果。 4.探討了誘導(dǎo)花芽分化相關(guān)因子對(duì)成花相關(guān)基因表達(dá)的影響。低溫促使了芽中蔗糖與DHA的積累及SOC1基因的調(diào)控表達(dá),用蔗糖、抗壞血酸、DHA離體處理K326的芽,檢測(cè)SOC1基因的表達(dá)
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