方格星蟲多糖的分離純化及其抗輻射作用研究.pdf

1、[目的]
　　 比較不同地區(qū)方格星蟲的營(yíng)養(yǎng)成分，篩選優(yōu)質(zhì)原材料。采用現(xiàn)代工藝制備方格星蟲多糖(Sipunculus Nudus Polysaccharides，SNP)，優(yōu)化制備工藝，初步分析SNP的理化性質(zhì)，在動(dòng)物水平上闡明SNP的抗輻射作用。
　　 [方法]
　　 (1)方格星蟲原材料的篩選和營(yíng)養(yǎng)成分分析
　　 比較分析3個(gè)不同產(chǎn)地來(lái)源方格星蟲的營(yíng)養(yǎng)成分，從感官指標(biāo)(外觀、活力、氣味、組織形態(tài)等)、理

2、化指標(biāo)(水分、鹽分、營(yíng)養(yǎng)成分等)、安全指標(biāo)(鉛、砷、汞、鎘等)等方面篩選原材料。
　　 (2)SNP的分離純化以及主要理化性質(zhì)分析
　　 對(duì)方格星蟲多糖的酶解法和堿解法提取工藝進(jìn)行比較，篩選確定脫蛋白方法，并對(duì)影響星蟲多糖產(chǎn)率的多種因素進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，得出方格星蟲多糖制備優(yōu)化工藝。應(yīng)用Molish反應(yīng)、硫酸—蒽酮反應(yīng)、硫酸—苯酚試劑反應(yīng)、斐林(Fehling)試劑反應(yīng)等進(jìn)行多糖的化學(xué)鑒別。通過(guò)紅外光譜初步鑒別星蟲多糖的結(jié)構(gòu)

3、，用氣象色譜法研究了星蟲多糖中單糖組成；
　　 (3)SNP的抗輻射生物學(xué)活性測(cè)定
　　 用60Coγ照射小鼠，造成小鼠輻射損傷模型。觀察方格星蟲多糖灌胃給藥對(duì)動(dòng)物輻射損傷的保護(hù)作用，指標(biāo)包括免疫功能、造血系統(tǒng)，抗氧化功能等；
　　 (4)SNP抗輻射作用機(jī)制探討
　　 通過(guò)小鼠的提高免疫實(shí)驗(yàn)和比格犬的抗輻射實(shí)驗(yàn)，從提高免疫、增強(qiáng)肝臟脂代謝等方面研究探討方格星蟲多糖的抗輻射機(jī)制。
　　 [結(jié)果]<

4、br>　　 (1)北海產(chǎn)方格星蟲的營(yíng)養(yǎng)成分高，重金屬含量低，被用作批量提取SNP的原材料，制定了適用于該產(chǎn)地的方格星蟲原材料的選取指標(biāo)。
　　 (2)工藝比較結(jié)果表明堿解和三氯乙酸脫蛋白法制備獲得的SNP多糖含量較高，且得率也高。根據(jù)正交試驗(yàn)方差分析結(jié)果，影響SNP產(chǎn)率因素的大小順序是NaOH濃度>料液比>時(shí)間>溫度。確定SNP的最佳工藝條件為料液比1：4、NaOH濃度6％、溫度60℃、時(shí)間4 h。
　　 (3)紅外光

5、譜圖顯示，SNP具有典型的多糖特征吸收峰(3403、2930、1728、1647、1416 cm—1)。氣相色譜結(jié)果顯示SNP主要由阿拉伯糖(7．91％)和葡萄糖(79．32％)兩種單糖組成，其余約有12％的成分為一些信號(hào)很小的雜峰，未能與所選擇的單糖標(biāo)準(zhǔn)品相對(duì)應(yīng)，也可能為其他糖類，有待進(jìn)一步深入研究。
　　 (4)動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果表明，SNP能延長(zhǎng)輻射損傷小鼠的平均存活時(shí)間，提高存活率，且具有很好的抗氧化作用，對(duì)造血功能也起到一定