桑黃多糖分離純化及其藥理作用研究.pdf

1、桑黃（Phellinus baumii）是一種具有多種藥理作用的真菌子實(shí)體，因寄生于桑樹(shù)而得名?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)桑黃多糖具有抗腫瘤、抗炎癥、抗氧化、降血糖、免疫調(diào)節(jié)、護(hù)肝等多種藥理作用。本論文主要以桑黃子實(shí)體粗多糖以及分離純化得到的純多糖為研究對(duì)象，研究其抗癌和免疫調(diào)節(jié)作用機(jī)制，為桑黃多糖綜合開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。研究?jī)?nèi)容如下:
　　1)采用超聲波輔助熱水浸提法提取桑黃粗多糖，優(yōu)化了料液比、提取溫度和提取時(shí)間這三個(gè)工藝條件。當(dāng)料液比

2、為1∶26，提取溫度為100℃，提取時(shí)間為4.35 h時(shí)，桑黃多糖的平均提取得率為1.645％，其與理論預(yù)測(cè)值相比的相對(duì)誤差為3.58％，說(shuō)明試驗(yàn)建立的桑黃多糖提取得率回歸預(yù)測(cè)模型具有較好的擬合性。研究結(jié)果為桑黃的深度開(kāi)發(fā)利用提供了依據(jù)。
　　2)將用超聲波輔助熱水浸提法提取到的桑黃粗多糖，用DEAE離子交換柱和Sephacryl S400/S200凝膠柱進(jìn)行純化，再用紅外光譜掃描儀進(jìn)行定性檢測(cè)。結(jié)果得到了較為均一的桑黃多糖(PB

3、PP)，這為后續(xù)研究桑黃多糖的藥理作用奠定了基礎(chǔ)。
　　3)通過(guò)抗DPPH、抗羥自由基和還原能力試驗(yàn)，研究桑黃多糖的抗氧化能力。與陰性對(duì)照組相比，試驗(yàn)組在統(tǒng)計(jì)學(xué)上均達(dá)到顯著性水平，說(shuō)明桑黃多糖具有抗氧化作用。
　　4)通過(guò)CCK-8法檢測(cè)桑黃多糖對(duì)HELA和SGC-7901兩種細(xì)胞系的增殖影響，結(jié)果表明桑黃多糖能顯著抑制HELA和SGC-7901細(xì)胞的增殖，表現(xiàn)出一定的抗癌效果。分析細(xì)胞周期圖譜后發(fā)現(xiàn)，桑黃多糖對(duì)HELA細(xì)胞

4、的抑制作用主要是通過(guò)將細(xì)胞分裂阻滯在G2期，對(duì)SGC-7901細(xì)胞的抑制作用主要是通過(guò)將細(xì)胞阻滯在S期，表明桑黃多糖通過(guò)阻礙細(xì)胞分裂以實(shí)現(xiàn)抗癌作用。
　　5)分別采用CCK-8法、中性紅試驗(yàn)法、免疫細(xì)胞因子檢測(cè)法、細(xì)胞周期檢測(cè)法，研究桑黃多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞的增殖、吞噬能力、分泌免疫因子及分裂的影響。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)桑黃多糖能促進(jìn)RAW264.7細(xì)胞增殖，增強(qiáng)其吞噬能力，促進(jìn)其分泌IL-6和TNF-α細(xì)胞因子，并增強(qiáng)細(xì)胞周期中的S期