蜂毒肽的分離純化及其抗輻射作用機理研究.pdf

1、本文所述的蜂毒肽是通過對使用OF-1型超級蜜蜂電子自動取毒器采自福建農林大學蜂學學院教學蜂場的意大利蜜蜂蜂毒，經葡聚糖凝膠層析等分離純化后，再經電泳對組分進行鑒定，證實其為電泳級純度。通過腹腔注射蜂毒肽小鼠經鈷60輻射后的存活時間、骨髓微核致變、染色體畸變和單細胞凝膠電泳(SCGE)等試驗結果來評估蜂毒肽的抗輻射作用。采用MTT法測定各實驗組小鼠脾細胞的轉化率，以鄰苯三酚自氧化體系和Fenton體系測定蜂毒肽對超氧陰離子和羥自由基的清除

2、作用，探究了蜂毒肽的抗輻射主要作用機理。所得結果如下： 1．蜂毒肽的抗輻射作用結果顯示，蜂毒肽可以有效提高受照射小鼠的平均存活時間和存活率，當照射前給小鼠腹腔注射低、中、高劑量(0.6、0.8、1.0mg/Kg體重)蜂毒肽可以使小鼠的存活時間提高3.2、12.4、5.7天，存活率提高21.9％，52.6％，28.3％。蜂毒肽使受試組小鼠骨髓細胞微核率分別降低3.36‰、8.09‰、8.15‰，分別降低了26.4％、63.5％、6

3、4.0％，染色體畸變率分別下降了7.8％、17.1％、17.4％。，當照射前24小時給小鼠腹腔注射0.8mg/kg蜂毒肽時表現最佳，可以使小鼠的存活時間提高12.4．天，存活率提高52.6％；小鼠的骨髓細胞微核率較空白對照組降低了8.09‰，下降率達64％；而受試組小鼠的染色體畸變率比對照組下降了17.1％。 SCGE試驗發(fā)現，注射蜂毒肽的試驗組骨髓細胞彗星細胞率明顯高于未加入蜂毒肽的空白試驗組，蜂毒肽使骨髓細胞彗星細胞率分別降

4、低32.5％，57.6％，44.81％。沒有注射蜂毒肽的空白對照組小鼠的骨髓細胞的彗尾長度明顯高于其他實驗組，注射蜂毒肽的小鼠骨髓細胞的彗尾長度比空白分別降低34.2％，40.3％，37.2％。證明了蜂毒肽可以有效的保護受照射小鼠的骨髓細胞DNA，減少DNA的輻射損傷。 2．蜂毒肽的抗輻射作用機理受照射24小時后的小鼠的脾細胞進行體外培養(yǎng)，用MTT法測定各實驗組小鼠脾細胞的轉化率，結果顯示：照射前加入蜂毒肽可以提高小鼠脾細胞轉化

5、率，低劑量(0.6mg/kg)的肽可以使小鼠脾細胞轉化率提高9.1％，中等劑量組(0.8mg/kg)的小鼠脾細胞轉化率比空白組高了12.9％，高劑量組(1.0mg/Kg)比空白組提高了15％。蜂毒肽抗輻射的作用機制之一是促進脾細胞的增殖，提高機體免疫力。以鄰苯三酚自氧化體系和Fenton體系測定蜂毒肽對超氧陰離子和羥自由基的清除作用。試驗結果顯示，在反應體系中加入10μl濃度為10mg/ml、20mg/ml、30mg/ml的蜂毒肽時對超