創(chuàng)傷性異位骨化早期相關(guān)因子的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  異位骨化是指軟組織中出現(xiàn)成熟骨組織的病理現(xiàn)象。根據(jù)其形成原因分為遺傳性和獲得性異位骨化,其中,以創(chuàng)傷性異位骨化最為多見。目前,隨著創(chuàng)傷(交通傷導(dǎo)致的高能量創(chuàng)傷以及人工關(guān)節(jié)置換的廣泛應(yīng)用等等)的不斷增加,異位骨化的發(fā)病率備受關(guān)注,一旦發(fā)生,將給患者帶來長期的疼痛,關(guān)節(jié)活動受限等癥狀,嚴(yán)重的降低了忠者的生活質(zhì)量。目前,臨床上常用的預(yù)防異位骨化的方式包括:非甾體類抗炎藥及小劑量放射治療。但因其干擾骨折愈合過程,胃部刺激或潛在

2、的惡性腫瘤危險等副作用,在臨床上使用受限。異位骨化有效治療方法是手術(shù)切除異位骨化的骨組織,但會給患者造成二次損傷。為進(jìn)一步降低異位骨化發(fā)生率,其分子機制及早期預(yù)防的研究具有重要意義。
  本研究基于大鼠跟腱鉗夾、切斷模型誘導(dǎo)創(chuàng)傷性異位骨化,旨在了解創(chuàng)傷性異位骨化早期相關(guān)因子的表達(dá)情況,探討其在創(chuàng)傷性異位骨化發(fā)病機制中的作用及意義。
  方法:
  取8~10周齡雄性SD大鼠68只,體質(zhì)量(210.1±10.6)g,隨機

3、分為實驗組及對照組(n-34)。實驗組通過跟腱鉗夾、切斷法制備創(chuàng)傷性異位骨化模型,對照組僅暴露跟腱,跟腱不作任何處理。術(shù)后觀察兩組大鼠一般情況,于3、5、8及14天兩組各處死6只大鼠,取跟腱及周圍組織行大體及組織學(xué)染色觀察;同時對GEO數(shù)據(jù)庫中異位骨化相關(guān)因子表達(dá)譜及大量文獻(xiàn)進(jìn)行分析,篩選出25種相關(guān)因子。采用實時定量PCR技術(shù)檢測不同時間點25種相關(guān)因子的基因表達(dá)情況,篩選出有統(tǒng)計學(xué)及臨床意義的因子,采用免疫組化等技術(shù)進(jìn)行驗證。兩組剩

4、余10只大鼠于術(shù)后10周攝X線片,取跟腱及其周圍組織行組織學(xué)染色觀察,綜合評價異位骨化形成情況。
  結(jié)果:
  術(shù)后3天實驗組1只大鼠死亡,其余大鼠均存活至實驗完成。大體及組織學(xué)染色觀察示:各時間點對照組大鼠跟腱及其周圍組織無明顯變化,呈正常跟腱結(jié)構(gòu);實驗組大鼠跟腱斷端萎縮,壞死,有炎性細(xì)胞浸潤;隨時間延長,其跟腱斷端出現(xiàn)硬結(jié),其硬度不斷增加,有大量不規(guī)則結(jié)締組織及軟骨細(xì)胞。實時定量PCR數(shù)據(jù)顯示:與對照組相比,實驗組BM

5、P-1,TGF-β1,IL-1β,HIF-1α,MMP-2各時間點表達(dá)均上調(diào),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。BMP-4,GDF-8,TNF-α各時間點表達(dá)均下調(diào),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。免疫組化染色證實了BMP-1,TGF-β1,IL-1β,HIF-1α,MMP-2蛋白的存在。結(jié)合術(shù)后10周X線片及組織學(xué)觀察結(jié)果,實驗組均發(fā)生異位骨化,對照組無異位骨化發(fā)生。
  結(jié)論:
  在大鼠跟腱創(chuàng)傷性異位骨化早期,BMP

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