雪菊質(zhì)量評價研究.pdf

1、雪菊為菊科植物兩色金雞菊（Coreopsis tinctoria Nutt.）的干燥頭狀花序，具有降血壓、降血脂、抑制高血糖的作用。目前雪菊藥材質(zhì)量評價方法及標(biāo)準(zhǔn)的欠缺，制約了雪菊的開發(fā)及應(yīng)用。本論文通過生藥學(xué)研究、活性成分含量測定、高效液相色譜（HPLC）指紋圖譜分析等方面研究工作的開展，旨在為雪菊藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供依據(jù)。主要研究方法和結(jié)果如下：
　　方法：
　　1、生藥學(xué)研究：收集了20批雪菊藥材進(jìn)行初步性狀鑒別、顯

2、微鑒別研究，建立了以綠原酸、木犀草素為指標(biāo)成分的薄層色譜鑒別方法：（1）在聚酰胺薄膜上，以36％乙酸為展開劑，紫外燈下365nm處檢測綠原酸成分；（2）硅膠G板上在環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸（3:5:0.5）系統(tǒng)中展開，AlCl3顯色，365nm下檢測木犀草素成分。
　　2、總黃酮含量測定：以總黃酮提取量為指標(biāo)，通過 Box-Behnken響應(yīng)面法考察乙醇體積分?jǐn)?shù)、料液比、超聲時間和溫度對總黃酮提取量的影響。篩選了雪菊總黃酮成分的最佳

3、提取工藝，測定了總黃酮含量。
　　3、綠原酸、木犀草素HPLC測定：使用Agilent TC-C18（4.6mm×250mm,5μm）為色譜柱，以乙腈-0.1%磷酸水為流動相，流速1.0mL，柱溫30 ℃，檢測波長分別為328、350nm，對20批藥材兩種活性成分含量進(jìn)行了測定并比較分析。
　　4、雪菊藥材指紋圖譜分析方法：采用 HPLC建立雪菊的指紋圖譜，用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)（A）版建立指紋圖譜共有模式并進(jìn)行相

4、似度計算，用SIMCA-P11.0軟件建立PLS-DA模型分析新疆、云南雪菊質(zhì)量差異。
　　結(jié)果：
　　1、雪菊藥材舌狀花單輪，黃色花瓣8枚；基部或中下部紅褐色，管狀花紫褐色?？偘?層，內(nèi)層長于外層；粉末的顯微特征可見不定式氣孔、花粉粒、薄壁細(xì)胞、導(dǎo)管、纖維、分泌道、花冠表皮細(xì)胞。薄層色譜鑒別可見不同產(chǎn)地藥材在對照品位置有相同斑點，表明藥材中都含有綠原酸、木犀草素成分。
　　2、雪菊總黃酮最佳提取工藝為乙醇體積分?jǐn)?shù)6

5、5%，料液比40g/mL，超聲時間34min，超聲溫度62 ℃。含量測定結(jié)果表明：雪菊藥材中總黃酮的含量范圍為177.06～254.85mg/g。
　　3、HPLC測定結(jié)果表明：綠原酸在濃度9.9～99.0μg/mL時與峰面積的線性關(guān)系良好，回歸方程：y=13402x-652.38（R2=0.9998）。平均回收率為100.66%（n=6）。RSD為1.79%；木犀草素在濃度0.97～19.40μg/mL與峰面積的線性關(guān)系良好，回

6、歸方程：y=27343x+4401.2（R2=0.9999）。平均回收率為98.89%（n=6），RSD為1.71%。該方法準(zhǔn)確、靈敏，重復(fù)性良好，可用于雪菊綠原酸、木犀草素的含量測定。不同產(chǎn)地雪菊綠原酸、木犀草素含量有差異，兩成分的含量范圍依次為0.93～3.91mg/g，0.61～1.32mg/g。
　　4、雪菊藥材指紋圖譜結(jié)果表明：指紋圖譜具有17個共有峰，通過對照品指認(rèn)出綠原酸、木犀草素2種成分。進(jìn)一步進(jìn)行相似度分析，20