雪菊總黃酮的制備及其抗氧化活性研究.pdf

1、雪菊為菊科植物兩色金雞菊（Coreopsis tinctoria Nutt.）的花，在新疆地區(qū)作為花茶飲用并具有降壓、降糖及降脂等功效。近年研究表明雪菊中的黃酮類(lèi)物質(zhì)是其主要活性成分，但相關(guān)成分的分析和活性研究相對(duì)薄弱。本課題前期采用單因素考察結(jié)合響應(yīng)面設(shè)計(jì)法，研究建立了雪菊總黃酮的優(yōu)化提取工藝。本文以馬里苷和黃諾瑪苷為指標(biāo)性成分，采用大孔樹(shù)脂對(duì)雪菊總黃酮的精制工藝進(jìn)行研究，并對(duì)其抗氧化活性進(jìn)行測(cè)試，為闡釋雪菊藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利

2、用提供參考。
　　本論文采用大孔樹(shù)脂，以馬里苷為指標(biāo)性成分，研究建立了雪菊總黃酮制備工藝。選用D101、AB-8、LX-17以及XDA-8等四種代表性大孔樹(shù)脂進(jìn)行篩選，優(yōu)選出制備性能較好的AB-8大孔樹(shù)脂，采用動(dòng)態(tài)法實(shí)驗(yàn)考察，建立的優(yōu)化工藝為：雪菊藥材采用20倍35％乙醇提取2次，每次60 min，提取液合并濃縮至相當(dāng)于生藥材0.5 g/ml，上預(yù)處理好的AB-8樹(shù)脂柱（柱體積，1BV），依次用水（4BV）、10%乙醇（4BV）、

3、75%乙醇（5BV）、95%乙醇（2 BV）洗脫，75%乙醇洗脫部分減壓濃縮，干燥，即得雪菊總黃酮（CTTF）提取物。進(jìn)一步采用 LX2000小孔樹(shù)脂、反相硅膠、凝膠等柱色譜分離技術(shù)，從CTTF中分離得到其主要成份馬里苷和黃諾瑪苷。采用高效液相法分析，測(cè)得CTTF中黃諾瑪苷和馬里苷的含量分別為55.30、35.73 mg/g。采用亞硝酸鈉顯色法，以蘆丁為對(duì)照品，測(cè)得雪菊總黃酮中以蘆丁計(jì)總黃酮含量為58.95%。
　　分別采用DPP

4、H、ABTS兩種自由基清除實(shí)驗(yàn)，以蘆丁為對(duì)照，對(duì)雪菊總黃酮及其主成份的抗氧化活性進(jìn)行測(cè)試。結(jié)果表明，雪菊總黃酮對(duì)兩種自由基均有較強(qiáng)的清除能力，并與樣品劑量呈正相關(guān)。按半數(shù)清除率濃度（IC50，g/mL）計(jì)，清除DPPH自由基的能力為馬里苷（6.84）>蘆?。?.72）>黃諾瑪苷（19.79）>雪菊總黃酮（30.43）；清除ABTS自由基能力大?。貉┚湛傸S酮（45.1）>蘆?。?9.1）>馬里苷（92.6）>黃諾瑪苷（117.5）。研究結(jié)