明日葉總黃酮提取、純化分離以及抗氧化活性的研究.pdf

1、明日葉是一種藥食兼用的植物，富含黃酮類物質(zhì)、香豆素、有機(jī)鍺、維生素B12等多種有效成分。在臨床上常用來治療泌尿和便秘。本文主要對明日葉中主要有效成分-黃酮的提取和純化工藝進(jìn)行了研究，并對其進(jìn)行了分離鑒定，最后對黃酮類物質(zhì)的抗氧化活性進(jìn)行了研究，為明日葉的開發(fā)和應(yīng)用提供理論參考。
　　本研究結(jié)論如下:
　?。?）以總黃酮提取率為指標(biāo)，通過單因素實驗考察乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取溫度、料液比、提取時間對黃酮提取率的影響，運用Box-Be

2、hnken設(shè)計響應(yīng)面優(yōu)化明日葉總黃酮的提取工藝，確定最佳提取條件：53％（v.v-1）乙醇，17:1（mL/ g）的液料比，溫度為82℃，提取時間為2h；
　?。?）以吸附率和解析率為指標(biāo)，采用靜態(tài)-動態(tài)吸附與解析相結(jié)合的方法，從12種樹脂中篩選出純化明日葉總黃酮最佳的樹脂并對其純化工藝條件進(jìn)行探討。結(jié)果表明：HPD-600大孔樹脂對明日葉總黃酮有較好的吸附、解析效果。最佳純化條件為：上柱液總黃酮質(zhì)量濃度控制在2mg/mL～3mg

3、/mL之間，以3BV/h的流速過柱，樹脂達(dá)吸附飽和的上樣量為2.7BV；洗脫條件為：用蒸餾水沖洗至無色后，改用4BV，50%乙醇以2BV/h流速進(jìn)行洗脫。經(jīng) HPD-600樹脂純化后，明日葉總黃酮含量由4.46%提升至36.96%，提升近8倍。
　　（3）為追蹤明日葉抗氧化活性部位，將明日葉粗提取物過HPD-600大孔樹脂，收集50%乙醇洗脫物。采用不同極性有機(jī)溶劑對50%洗脫物進(jìn)行液-液萃取，將50%洗脫物分為乙酸乙酯相、正丁醇

4、相、水相三個不同極性溶劑萃取物，測定不同極性溶劑萃取物的總黃酮含量，研究各萃取物清除DPPH自由基、ABTS+自由基能力和總還原能力。結(jié)果表明：乙酸乙酯相的總黃酮含量高于其他溶劑相，且體外抗氧化能力最強(qiáng)。
　　（4）采用中壓柱色譜及高效液相色譜等分離方法，從明日葉乙酸乙酯部分分離出2個化合物單體，運用1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS等方法，結(jié)合文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，鑒定其分別為槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（quercetin-3