苧麻葉黃酮的提取、分離純化、結構及抗氧化活性的研究.pdf

1、苧麻(Boehmeria nivea)為蕁麻科苧麻屬多年生草本植物,是我國重要的出口創(chuàng)匯經(jīng)濟作物,而苧麻葉作為工業(yè)廢棄品丟棄,資源浪費嚴重并污染環(huán)境。苧麻葉具有一定藥用價值,本文以苧麻葉為原料,對其中的活性成分黃酮類化合物進行提取、分離純化,結構及抗氧化活性進行研究。
　　 1苧麻葉黃酮類化合物提取工藝的優(yōu)化
　　 采用兩種方法對“華苧4號”苧麻葉中黃酮類化合物進行提取工藝研究。方法一為乙醇加熱回流法,通過對乙醇濃度、料

2、液比、提取時間和提取溫度進行正交實驗優(yōu)化,得出最佳的提取工藝條件是:料液比1:60,乙醇濃度70％,提取時間1.5h,提取溫度80℃,提取一次。在此工藝條件下苧麻葉(華苧4號)中黃酮類化合物得率為3.76％。方法二采用超聲輔助提取法,通過單因素及正交實驗,得出最佳的提取工藝條件是:液固比30:1,乙醇濃度70％,超聲功率60 W,超聲時間30 min,超聲溫度60℃,提取一次。在此工藝條件下苧麻葉中黃酮類化合物得率為4.94％。

3、　　 采用乙醇加熱回流法,通過對8個品種苧麻葉黃酮類化合物得率比較,得出“蘆竹青”黃酮得率最高,為6.62％；“華苧5號”黃酮得率最低,為2.74％。
　　 通過兩種方法比較,超聲輔助提取比乙醇提取苧麻葉黃酮類化合物的得率高1.18％,且所用溶劑和時間大大縮短。
　　 2苧麻葉黃酮類化合物的分離純化
　　 探討了四種大孔吸附樹脂(AB-8、D101、S-8和聚酰胺)對苧麻葉黃酮吸附的影響。通過靜態(tài)吸附和解吸實驗

4、得出,AB-8樹脂的綜合性能較佳,有較高的吸附率和解吸率。通過AB-8大孔吸附樹脂動態(tài)吸附.解析實驗,AB-8樹脂對苧麻葉中黃酮類化合物的動態(tài)洗脫的最佳條件為:溶液pH值為4,上樣液濃度為1.508 mg/mL,2 BV的70％乙醇洗脫,洗脫速率為1 mL/min。收集50％乙醇洗脫液,減壓濃縮后冷凍干燥,得到苧麻葉黃酮初步純化物(簡稱黃酮粗品),黃酮類化合物含量達到29.85％,與上柱前黃酮粗提物比較,提高了5.3倍。
　　

5、葡聚糖凝膠LM-20能有效的分離苧麻葉中黃酮類化合物。將過AB-8樹脂的黃酮初步純化物經(jīng)乙酸乙酯萃取,萃取液濃縮后過LH-20葡聚糖凝膠柱,分別以30％、50％、70％和90％甲醇洗脫。收集50％甲醇洗脫液和90％甲醇洗脫液,分別得到兩種組分RF1和RF2。通過高效液相色譜分析,純度均達到90％以上。
　　 3苧麻葉黃酮類化合物的結構初探
　　 通過顯色反應和UV,可初步推斷純化后的黃酮樣品為黃酮醇類化合物及異黃酮類化合

6、物。通過IR分析,其均具有黃酮類特征官能團。通過HPLC分析六種流動相,得到最佳的流動相為水(pH=3)-甲醇(0.45:0.55)。通過HPLC和GC分析,可初步斷定RF1物質(zhì)為蘆丁,組分2(RF2)需要進一步做液相-質(zhì)譜分析。
　　 4苧麻葉黃酮類化合物的抗氧化活性
　　 研究了化學模擬體系下苧麻葉黃酮粗品(過AB-8樹脂)和純化樣品R目的抗氧化能力。通過實驗得知,IC50Vc