屈曲花種子總黃酮提取、純化工藝以及抗氧化性能的研究.pdf

1、黃酮類化合物廣泛分布在植物種子、葉、果實中，具有抗氧化、抗衰老、抗癌等多種生物學活性，因而備受國內外學者的關注。目前，關于屈曲花種子提取黃酮類化合物的研究較少，且屈曲花的研究主要集中在國外，國內鮮有報道。本實驗以廣州田野風公司的屈曲花種子為原料，以總黃酮為考察指標，對屈曲花種子總黃酮的提取、純化、抗氧化活性等進行了系統(tǒng)研究。研究結果為屈曲花種子工業(yè)化應用提供了參考標準，也為廣泛開發(fā)利用屈曲花藥物資源提供了良好的參考價值。本研究的主要內容

2、與結果如下：
　?。?）利用超聲波輔助提取法對屈曲花種子總黃酮進行提取，通過正交設計試驗和響應面法共同對提取工藝參數進行優(yōu)化，得到粗提物。固定粉碎粒度為60目，最優(yōu)條件為：乙醇濃度83％、超聲時間11min、料液比62( mL/g)，超聲功率96 W。此條件下，黃酮得率為2.568±0.05%。其中，乙醇濃度對屈曲花種子總黃酮得率的影響最大，其次依次為提取時間、料液比、超聲波功率。
　?。?）通過6種大孔樹脂對屈曲花種子總黃

3、酮粗提物的靜態(tài)吸附解吸性能的比較，篩選出了最優(yōu)樹脂X-5。通過大孔樹脂X-5的靜態(tài)試驗和動態(tài)試驗確定了純化屈曲花種子總黃酮的最佳工藝參數：上樣濃度1.569 mg/mL，上樣量30 mL、上樣流速1.5 mL/min、原液上樣、乙醇洗脫濃度70%、洗脫量100 mL、洗脫流速1.0 mL/min。在此工藝條件下，所得總黃酮純度為74.59%，較純化前9.18%提高了8倍。進一步通過顯色反應結合紫外光譜特征鑒別精提物總黃酮類型，初步確定了

4、含黃酮類和黃酮醇（3-OH取代）物質。
　?。?）考察屈曲花種子總黃酮的體外自由基清除能力和IPEC-J2細胞損傷測定實驗，結果表明屈曲花種子總黃酮能夠很好地清除DPPH·自由基。通過還原力實驗，發(fā)現當精提物濃度大于0.4 mg/mL時，還原力比相同濃度的BHT大，說明屈曲花種子總黃酮具有較好的抗氧化活性能力。在IPEC-J2細胞損傷模型實驗中，通過觀察比較細胞存活率及其ROS熒光結果，發(fā)現在12.5-50μg/mL濃度范圍內，精