冬棗黃銅類(lèi)提取、純化及其抗氧化性能的研究.pdf

1、棗是我國(guó)的特產(chǎn),在我國(guó)大面積種植,資源十分豐富。鮮棗甜美可口,營(yíng)養(yǎng)十分豐富,含有多種生理活性物質(zhì),如黃酮類(lèi)化合物、皂甙類(lèi)化合物、多糖、環(huán)磷腺苷類(lèi)、蛋白質(zhì)、纖維素等物質(zhì),具有益氣補(bǔ)血,抗氧化等生物活性,具有巨大的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用潛力。
　　本研究以冬棗為原料,用乙醇法提取黃酮類(lèi)物質(zhì),用發(fā)酵的方法制發(fā)酵棗粉,然后通過(guò)體外清除自由基,H2O2誘導(dǎo)細(xì)胞氧化應(yīng)激模型,小鼠高脂模型等方法對(duì)提取的棗黃酮類(lèi)物質(zhì)、棗粉、發(fā)酵棗粉分別進(jìn)行了體外和體內(nèi)的抗氧

2、化研究。以期為棗活性物質(zhì)提取以及保健食品的開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供理論依據(jù)。通過(guò)分析,主要研究結(jié)果如下:
　　1.采用乙醇浸提法提取冬棗中的黃酮類(lèi)物質(zhì),經(jīng)DPH-417粗提得樣品FW-1,再用硅膠柱層析純化FW-1得樣品FW-2。通過(guò)NaNO2-Al(NO3)3比色法檢測(cè),FW-1中黃酮類(lèi)物質(zhì)含量為67.6％,FW-2中黃酮類(lèi)物質(zhì)含量為92.7%。通過(guò)LC-MS,推斷出樣品FW-2為多種黃酮類(lèi)的混合物,主要成分為雙黃酮類(lèi)物質(zhì),分子量為790。

3、
　　2.試驗(yàn)通過(guò)發(fā)酵的方法,添加1%的酵母粉對(duì)新鮮的棗漿進(jìn)行發(fā)酵處理,確定了發(fā)酵工藝,得到的發(fā)酵棗粉,總糖含量降低了13.87%,蛋白質(zhì)含量增加了77.4%。
　　3.通過(guò)FRAP法測(cè)定總抗氧化能力、還原性測(cè)定、清除DPPH自由基、清除羥基自由基、清除超氧陰離子的能力等五種方法對(duì)棗黃酮類(lèi)化合物和兩種棗粉的體外抗氧化能力進(jìn)行評(píng)價(jià)。其中FW-1,FW-2的總抗氧化能力、還原能力高于相同質(zhì)量濃度的Vc;清除DPPH自由基的能力與

4、Vc相比差別較小;可以有效清除羥自由基,但能力略低于同濃度下的Vc;清除超氧陰離子的效果不如Vc明顯。棗粉和發(fā)酵棗粉也表現(xiàn)出較好的抗氧化和清除自由基的作用,但是能力相比同濃度下的Vc差。
　　4.通過(guò)H2O2誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞氧化應(yīng)激模型對(duì)FW-1、FW-2、棗粉和發(fā)酵棗粉進(jìn)行了抗氧化評(píng)價(jià)。得出H2O2為10mmol/L時(shí),誘導(dǎo)細(xì)胞氧化效果較好。FW-1、FW-2在0.5mg/mL和1mg/mL時(shí)可以有效降低H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)

5、活性氧(ROS)的水平,提高H2O2誘導(dǎo)細(xì)胞的存活率,減少細(xì)胞氧化損傷;減少細(xì)胞內(nèi)外MDA的水平。棗粉、發(fā)酵棗粉在1mg/mL和2mg/mL時(shí)可以有效降低H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的水平;提高H2O2誘導(dǎo)細(xì)胞的存活率,減少細(xì)胞氧化損傷;減少細(xì)胞內(nèi)外MDA的水平。
　　5.通過(guò)對(duì)高脂模型小鼠作用的研究。用FW-1(150mg/kg.d和300mg/kg.d劑量)連續(xù)灌胃6周,結(jié)果顯示FW-1可以有效降低高脂模型小鼠的血脂水