沙棘多糖的提取純化、結(jié)構(gòu)鑒定及其抗氧化性的研究.pdf

1、本文以黑龍江省農(nóng)科院漿果研究所培育的大果沙棘HS-4、HS-12、HS-15、HS-19、HS-21、HS-22、綏棘2號(hào)、綏棘3號(hào)、優(yōu)勝、楚伊、卡圖尼、渾金、豐產(chǎn)、巨人、烏蘭格木、橙色、金色共十七個(gè)品種為試材，對(duì)沙棘多糖的提取方法，純化工藝，精多糖的分級(jí)、分子量、結(jié)構(gòu)及抗氧化性進(jìn)行了研究。 在沙棘多糖的提取過(guò)程中，以大果沙棘HS-12為試材，首先分別對(duì)木瓜蛋白酶提取法和超聲波提取法進(jìn)行研究，確定這兩種提取方法的最佳提取工藝；然

2、后將這兩種方法以不同方式結(jié)合，并最終確定沙棘多糖的最佳提取條件。在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，采用正交試驗(yàn)得到木瓜蛋白酶的最佳提取工藝為：加酶量2％，pH值5.5，提取溫度45℃，提取時(shí)間20min，多糖提取量44.28mg/g；超聲波法提取多糖的最佳條件為：超聲功率480W，超聲時(shí)間55min，固液比1∶20，提取量48.63mg/g。在此基礎(chǔ)上將這兩種方法以不同方式進(jìn)行結(jié)合：超聲波法與酶法同時(shí)進(jìn)行提取，提取量為53.30mg/g；先進(jìn)行超聲波

3、提取而后進(jìn)行酶法提取，提取量為54.68mg/g。將這兩種提取方法進(jìn)行比較：超聲波法與酶法同時(shí)進(jìn)行提取方法的多糖提取量最高，但從節(jié)省時(shí)間等因素綜合考慮最終選擇超聲波法與酶法同時(shí)進(jìn)行提取的方法為最佳提取方案。 在脫蛋白工藝研究中，比較了Sevag法(10次)、木瓜蛋白酶法與木瓜蛋白酶+Sevag法(3次)三種脫蛋白方法的效果。蛋白質(zhì)去除率分別為51.10％、50.18％、88.17％；多糖提取量分別為2.51mg/g、54.30m

4、g/g和48.56mg/g。從蛋白去除率和多糖提取量?jī)煞矫婢C合考慮，確定木瓜蛋白酶與Sevag法結(jié)合作用為除蛋白最佳工藝。 采用最佳提取條件，測(cè)定了十七個(gè)沙棘品種的多糖含量，發(fā)現(xiàn)不同品種的大果沙棘多糖含量相差巨大。HS-12的多糖含量最高為54.30mg/g，橙色的多糖含量?jī)H為0.75mg/g，此研究對(duì)選育多糖含量較高的沙棘品種具有參考價(jià)值。 將脫色透析后的沙棘粗多糖通過(guò)DEAE-纖維素柱進(jìn)行分級(jí)，得到兩個(gè)級(jí)分，其中一個(gè)

5、級(jí)分HⅡ含量很高為沙棘多糖的主要成分。將此沙棘多糖級(jí)分進(jìn)行SepharoseCL-4B凝膠柱層析，得單一對(duì)稱峰；通過(guò)紫外分光光度法測(cè)定，得單一對(duì)稱峰；采用凍融分析得一均一淡黃色透明液體，由此證明HⅡ?yàn)榫唤M分。 通過(guò)粘度法測(cè)得此精多糖分子量為10.94×104；通過(guò)紅外光譜分析可知其糖苷鍵即有α構(gòu)型同時(shí)也具有β型；將其進(jìn)行酸水解而后，進(jìn)行紙色譜和薄層色譜分析測(cè)得其單糖組成含有木糖、葡萄糖、半乳糖。 分別采用DPPH自由基